El fijador más utilizado para la hibridación in situ es

Paraformaldehído.

La función principal del paraformaldehído para fijar las células es el formaldehído monomérico. La clave para una fijación eficaz del formaldehído es formar cadenas entrecruzadas entre los grupos terminales de las proteínas. Los grupos implicados en las proteínas fijadas con formaldehído son principalmente grupos amino, imino y amido, péptidos, grupos guanidina, grupos hidroxilo, SH y anillos aromáticos.

Los microorganismos fijados con paraformaldehído utilizan un fijador de formaldehído al 10% para reducir los cambios en el pH del fijador. Después de la fijación, se lavan minuciosamente con agua para reducir la reticulación intermolecular. Las secciones se tratan previamente antes de la tinción inmunohistoquímica. Reproducir el antígeno (recuperación de antígeno).