¿Cómo diseñar un laboratorio animal?

1. Clasificación y estándares de animales de experimentación

De acuerdo con los estándares de control microbiano para animales de experimentación, los animales de experimentación se pueden dividir en cuatro niveles:

El nivel 1 animales comunes (CV) se refiere a microorganismos que No están sujetos a controles especiales. Animales controlados en general. Se requiere excluir los patógenos que causan enfermedades en humanos y animales y una pequeña cantidad de patógenos que causan enfermedades infecciosas graves en animales de experimentación. Para prevenir enfermedades infecciosas, se deben tomar ciertas medidas al criar y criar animales de experimentación para garantizar que los resultados utilizados para las pruebas sean reproducibles (es decir, no importa que diferentes operadores utilicen la misma cepa en diferentes momentos, los experimentos realizados en animales de acuerdo con Los procedimientos experimentales prescritos pueden obtener casi los mismos resultados).

El Nivel 2 de Animales Limpios (CL) requiere la eliminación de patógenos responsables de enfermedades humanas y animales y de las principales enfermedades infecciosas de los animales.

Los animales libres de patógenos especiales (SPF) de nivel 3 requieren que, además del nivel 2, también se deben eliminar algunos patógenos específicos. Los métodos de esterilización y esterilización pueden utilizar el método de esterilización con filtro de aire de alta eficiencia, el método de esterilización ultravioleta, el método de pulverización de vapor de trietilenglicol y el método de pulverización de solución acuosa de cloruro de litio.

Nivel 4: Animales libres de gérmenes (GF) o animales simbióticos (GN). Los animales estériles deben estar libres de cualquier microorganismo que pueda detectarse mediante los métodos existentes. Los citozoos requieren la implantación de uno o varios microorganismos conocidos en animales estériles.

En términos de examen patológico, los cuatro tipos de animales de experimentación también tienen diferentes estándares de examen patológico.

Nivel 1: Aspecto saludable, sin lesiones en órganos importantes.

Nivel 2: Además de los indicadores primarios, el examen microscópico no muestra lesiones patógenas microbianas secundarias.

Animales de nivel 3 sin patógenos especiales. No hay lesiones patógenas microbianas secundarias o terciarias.

Las lesiones de nivel 4 no contienen patógenos microbianos secundarios ni terciarios. El bazo y los ganglios linfáticos son estructuras histológicas animales estériles.

En base a lo anterior, los animales de experimentación de diferentes niveles tienen diferentes requisitos en términos de diseño y manejo de la sala de animales.

Los animales que son estériles, que se sabe que tienen bacterias y que no tienen patógenos especiales deben criarse en un entorno estéril o lo más estéril posible. Este entorno actualmente se denomina generalmente entorno de barrera a nivel internacional, es decir, usando una barrera Separe al animal del ambiente circundante contaminado, al igual que la rata fetal en el útero de la madre. Desde la perspectiva del control de microorganismos, este entorno se divide en cinco categorías: sistema de aislamiento, sistema de barrera, sistema de semibarrera, sistema abierto y sistema de plataforma de flujo laminar.

Un Sistema de Aislamiento

es un sistema de crianza de animales en contenedores con guantes de manipulación y se utiliza para criar animales estériles y residentes. El interior mantiene un nivel de limpieza de 100 según los requisitos microbianos, pero la sala y el personal operativo no necesitan considerarse una sala estéril.

Sistema de barrera B

Se utiliza una sala limpia estéril de aproximadamente 10000~100000 grados como sala de cría, que se utiliza principalmente para la alimentación y cría a largo plazo de animales sin necesidad especial. patógenos. Se implementarán medidas estrictas al ingresar a la habitación, como ducharse, cambiarse y ponerse ropa personal, etc.

C Sistema de semibarrera

Relaja la gestión de personas y objetos que entran y salen de la habitación en el sistema de barrera. La composición del plano es aproximadamente la misma que la del sistema de barrera.

Sistema de Rack de Flujo Laminar D

La jaula se coloca en un flujo de aire laminar horizontal limpio. Se utiliza a menudo para la cría a pequeña escala, pero existe riesgo de contaminación al criarlo, operarlo y manipularlo en salas generales. Puede utilizarse como complemento semibarrera.

Sistema E open

Es un sistema que no descontamina personas, objetos, aire, etc. al entrar y salir de la habitación, pero suele requerir cierto grado de gestión de limpieza.

A continuación se enumeran los requisitos para los indicadores ambientales de animales de experimentación para varios sistemas:

◆ Indicadores del proyecto sistema abierto (CV) sistema de barrera simple (CL) sistema de barrera (SPF) sistema de aislamiento ( GF, GN)

◆ Temperatura/℃ 18~29 18~29 18~29 18~29

◆ Diferencia de temperatura diaria/℃ 8 3 3 3

◆ Humedad relativa/40~70 40~70 40~70 40~70

◆ Número de cambios de aire/(veces/h) 10~15 10~15 10~15

◆ Velocidad del flujo de aire/(m/s) 0,18 0,18 0,18

◆ Diferencia de presión/Pa 20~50 20~50 20~50

◆ Limpieza/nivel 100.001 100

◆ Número de colonias/[piezas/(placa?h)] 12,2 2,45 0,49

◆ Concentración másica de amoniaco/(mg/ m3) 14 14 14 14

◆ Ruido/dB ≤60 ≤60 ≤60 ≤60

◆ Iluminación/lx 150~300 150~300 150~300 150~300

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El Las medidas de depuración para alcanzar los indicadores ambientales de la sala de animales son:

A. Sistema de purificación de aire

Debido a que la sala de animales es un lugar donde los animales de experimentación se mueven durante mucho tiempo, es imposible esterilizar frecuentemente la sala mediante fumigación y lavado en condiciones de reproducción. Generalmente, solo se pueden usar desinfectantes débiles. Lavar, en este caso, para evitar infecciones microbianas, asegurar la purificación del aire es la primera condición;

B. Aire fresco

Prevenir la contaminación del tráfico y la desodorización son dos problemas difíciles. Sin embargo, la mayoría de los sistemas de aire acondicionado de purificación deben utilizar aire fresco, debido a que el sistema de purificación tiene una gran cantidad de cambios de aire. aire fresco, por lo que el problema del consumo de energía es destacado;

C. Desodorización

Esto no sólo es necesario para el entorno externo y el personal, sino también para los propios animales de experimentación. Porque, además de la contaminación microbiana externa en el interior, también son contaminantes importantes el amoníaco, el sulfuro de hidrógeno, el alcohol y otros gases generados por los propios excrementos del animal y la transformación secundaria de los microorganismos. Cuanto más fuerte es el olor de estos gases, menor es la limpieza del propio animal. . Actualmente no existen datos cuantitativos ni un método de medición para el valor permitido del olor, pero se debe controlar la concentración de amoníaco. La desodorización generalmente incluye dos métodos: aumentar el aire fresco y la adsorción de carbón activado.

2. Rango de control de factores ambientales generales en salas de animales

(1) El valor objetivo de temperatura es 21~27 ℃. La farmacopea estipula que es de 17 a 28 ℃. Puede variar según la especie animal.

(2) Humedad 45~55. El Ministerio de Salud estipula que es entre 40 y 60 años.

(3) Velocidad del flujo de aire 10~25 cm/s. Evite el soplado directo.

(4) El número de ventilaciones es de 6 a 15 veces/h. El aire fresco es 2/3.

(5) Presión del aire: presión positiva en zonas limpias y presión negativa en zonas infectadas.

(6) Nivel de limpieza ambiental: Generalmente, las salas de cría de animales son superiores al nivel 100.000.

(7) Iluminación 150~300lx (iluminación artificial).

(8) Ruido 40~50dB (cuando no hay animales), 60 dB cuando hay animales, y el Ministerio de Salud estipula que sea inferior a 70 dB.

(9) Olor Amoniaco 20ppm.

3. Requisitos básicos para el diseño de casetas para animales

(1) Selección del sitio: tranquilo e higiénico

(2) Diseño: dividido en área de preparación, área de alimentación y área experimental. Se requiere separar el flujo de personas, logística y animales (se requiere proceso de purificación, esterilización y control de insectos).

(3) La construcción requiere pasillos limpios, cuartos de cría, pasillos contaminados y otras habitaciones.

(4) El sistema de aire acondicionado tiene temperatura y humedad controlables, velocidad y distribución del flujo de aire, y un cierto volumen de intercambio de aire y presión de aire.

(5) Iluminación: Las luces fluorescentes se utilizan en habitaciones de animales sin ventanas, y se pueden instalar ventanas de vidrio en habitaciones de animales con ventanas para filtrar los rayos ultravioleta. Se requiere que esté encendido durante 12 horas y en oscuridad durante 12 horas.

(6) Abastecimiento de agua Hay agua potable y agua purificada.

Cuatro. Configuración de salas para animales

De acuerdo con las necesidades de los diferentes tipos y niveles de animales de experimentación, establezca salas para animales, lugares de actividades y salas auxiliares correspondientes con las instalaciones correspondientes. El sitio debe seleccionarse en un lugar que pueda mantenerse tranquilo, limpio y libre de influencias externas adversas.

El cuarto de los animales debe tener suficiente luz, buena ventilación, pisos limpios y sin acumulación de agua; el techo y las paredes deben ser fáciles de limpiar y desinfectar; paredes exteriores, techos, techos, puertas, ventanas y tuberías; El acceso al exterior debe mantenerse alejado de animales exteriores, ya que pueden penetrar mosquitos, moscas y otras plagas. La temperatura interior se controla entre 18 y 29 ℃, la humedad relativa entre 40 y 70 y el ruido está dentro de los 60 dB.

La densidad de animales en la jaula no debe ser demasiado alta, y se deben proporcionar equipos de suministro de aire, extracción, refrigeración y calefacción. Se deben proporcionar instalaciones especiales de alcantarillado y drenaje para evitar la propagación de patógenos. Todo tipo de jaulas deben limpiarse y desinfectarse periódicamente, y la ropa de cama debe desinfectarse mediante altas temperaturas y presión o medicamentos y reemplazarse a tiempo para mantener la concentración de amoníaco en el interior por debajo de 15 mg/m3.