Determinación del contenido de clorofila

Método de medición del contenido de clorofila: espectrofotometría.

La espectrofotometría es un método de análisis cualitativo y cuantitativo de una sustancia midiendo la absorbancia de la luz en una longitud de onda específica o dentro de un rango de longitud de onda determinado. Tiene las ventajas de alta sensibilidad, fácil operación y rapidez, y es el método experimental más utilizado en experimentos bioquímicos.

Muchas sustancias se miden mediante espectrofotometría. En un espectrofotómetro, cuando se irradia continuamente luz de diferentes longitudes de onda a una solución de muestra de una determinada concentración, se puede obtener la intensidad de absorción correspondiente a diferentes longitudes de onda.

Principio básico: absorción selectiva

La interacción entre la materia y la luz tiene la característica de absorción selectiva. El color de una sustancia coloreada se produce por la interacción de la sustancia con la luz. Es decir, el color de una solución coloreada se debe a la absorción selectiva de luz por parte de las sustancias de la solución.

Debido a que diferentes sustancias tienen diferentes estructuras moleculares y diferentes capacidades de absorción para luz de diferentes longitudes de onda, los grupos estructurales con estructuras características tienen una longitud de onda real máxima que selecciona las características de absorción, formando un pico de absorción máximo y produciendo una absorción única. espectro.

Incluso una misma sustancia absorbe la luz en diferentes grados debido a su diferente contenido. El método de utilizar el espectro de absorción único de una sustancia para identificar la presencia de una sustancia (análisis cualitativo), o utilizar el grado de absorción de una sustancia en una determinada longitud de onda de luz para determinar el contenido de una sustancia (análisis cuantitativo), es llamado espectrofotometría.