¿Cuáles son las diez principales contribuciones realizadas por las plantas del género Ten Contributors?
Existen pocos informes sobre la determinación del contenido de los diez principales alcaloides. informó el uso del método de escaneo de capa delgada para determinar el contenido de ⅳ, ⅵ y ⅶ en corcho Phellodendron [12]. Se utilizó el método de densidad óptica de capa fina para determinar el contenido de ⅳ, ⅵ, ⅶ y magnolinina [13] en los tallos de los cuatro tipos de frutas principales. Se utilizó el método HPLC para determinar el contenido de ⅶ [14]. en las hojas de los cuatro tipos de frutas principales. Sobre la base del método de cromatografía líquida de alta resolución de longitud de onda variable para la determinación de alcaloides en las raíces del género Berberis [15], con el fin de desarrollar y utilizar los recursos vegetales de los diez géneros principales, se ha desarrollado un método de cromatografía líquida de alta resolución se estableció para determinar los alcaloides en las raíces de los diez géneros principales de plantas ⅶ. Estos siete componentes se pueden detectar una vez a una longitud de onda fija de 203 nm y dos veces a una longitud de onda variable de 203 ~ 346 nm. Este último no sólo permite detectar los siete componentes en sus respectivas longitudes de onda de máxima absorción, sino que también evita la interferencia de picos cromatográficos adyacentes con diferentes longitudes de onda de absorción, mejorando así la sensibilidad y precisión del análisis. Este artículo utiliza cromatografía líquida de alto rendimiento de longitud de onda variable para analizar cuantitativamente las raíces, corteza, madera, corteza y madera de tres plantas de los diez géneros principales de mi país, así como las raíces de 10 plantas de diferentes orígenes. Debido a la pequeña cantidad de materiales de referencia, sólo se analizaron cualitativamente I, III y V.
1 Prueba de instrumentos y reactivos
Cromatografía líquida de alto rendimiento Waters (bomba 510, detector 490E, muestreador U6K, estación de trabajo de cromatografía baseline 810).
Sustancias de referencia: clorhidrato de berberina, clorhidrato de palmatina y clorhidrato de jatrorricina se compraron del Instituto para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos de China. El investigador Tu del Instituto para el Control de Productos Farmacéuticos y Biológicos de China introdujo la tetrahexilamina en; África; la berbamina se compró en el Instituto de Silvicultura y Suelos de la Academia de Ciencias de China y se purificó mediante recristalización. La tetrandrina y la tetrandrina fueron proporcionadas por el Instituto de Plantas Medicinales de la Academia China de Ciencias Médicas (la sustancia de referencia se separó en un solo punto mediante cromatografía en capa fina de gel de sílice y dos sistemas de disolventes; se midieron mediante HPLC, la altura del pico y el área del pico de Los componentes principales estaban ambos en 97 Arriba. Los especímenes de plantas fueron identificados por Ying Shengjun, investigador del Instituto de Botánica de la Academia de Ciencias de China. El acetonitrilo era de grado cromatográfico, el metanol y el dihidrógeno fosfato de potasio eran de grado analítico.
2 Métodos experimentales y resultados
p>2.1 Condiciones cromatográficas [15]
Columna cromatográfica: μ-Bondapak fenilo (10μm). , 3,9 mm x 300 mm, Waters Company, EE. UU.); fase móvil: 0,02 mol·L-1 Dihidrogenofosfato de potasio-acetonitrilo (7:3); temperatura de flujo: 1,0 ml min-1; AUFS; longitud de onda de detección: longitud de onda fija 203 nm, 0,0-10,0 min longitud de onda variable 203 nm, 346 después de 10,0 min nm Los cromatogramas de 7 sustancias de referencia alcaloides se muestran en la Figura 1.
Figura 1. Cromatogramas de 7 alcaloides. (detectado a 203 nm)
Ⅰ. Equinona ⅱ. Tetrandrina ⅵ. 2.2 Ecuación de regresión y rango lineal. (μg) como abscisa (x) y el área del pico (microvoltios-segundo) como ordenada (y), la ecuación de regresión se muestra en la Tabla 1.
2.3 Preparación de la solución de muestra
Pese con precisión 0,65438±0g de muestra de polvo seco en un matraz Erlenmeyer de boca esmerilada de 50 ml, agregue 20 ml de metanol, pese, remoje durante 65438±02 h y realice extracción ultrasónica durante 60min, pesar, compensar el metanol perdido, agitar bien, sellar y dejar reposar tomar 5.0mL del sobrenadante en un tubo de centrífuga, sellar y centrifugar (10000 r min-1, 10min); 2,0 ml) como solución de muestra.
Tabla 1 Ecuación de regresión y rango lineal de análisis cuantitativo de cuatro alcaloides
Materias primas
Ecuación de regresión
r
Rango lineal/μg
Ⅱ
y = 9,017x×104 4,318×105
0,9993(n=7)
0,019~0,296
Ⅳ
y = 4,239 x×104-8,228×104
0,9999(n=9)
0,019 ~0,996
Ⅵ
y = 4,191x×104 1,446×105
0,9998(n=9)
0,020~1,008
Ⅶ
y = 4.209 x×104 1.278×105
0.9998(n=9)
0.020~1.010
2.4 Prueba de precisión [15]
Extraiga con precisión 10 μL de solución de muestra para inyección y repita la medición 10 veces. Se obtuvo la RSD () de la concentración (μg·mL-1) de cada componente de la muestra: berbamina 0,28, jatrorricina 0,84, palmatina 0,75 y berberina 1,21.
2.5 Prueba de recuperación de muestra
Pesar con precisión 0,05g de 5 porciones del polvo seco de los Diez Grandes Méritos de Angustifolia angustifolia en un matraz Erlenmeyer de boca esmerilada de 50mL, operar según las documente [15] y repita la medición para cada porción 3 veces; las recuperaciones calculadas de ⅱ, ⅳ, ⅵ y ⅶ son 97,2 ~ 102,1, 98,9 ~ 100,3, 97,2 ~ 100,1 y 99,9 respectivamente.
2.6 Análisis de muestras [15]
Extraiga con precisión 65438 ± 00 μL de solución de muestra para inyección, detectela a una longitud de onda variable de 203 ~ 346 nm y realice ⅱ, ⅳ, ⅵ y ⅶ Análisis cuantitativo y análisis cualitativo de ⅰ y ⅲ. Luego inyecte con precisión 10 μL, detecte a una longitud de onda fija de 203 nm, obtenga el espectro característico de cada muestra y realice un análisis cualitativo del componente V. Los resultados del análisis de siete alcaloides en las raíces, corteza, corteza, tallos y madera de tres de las diez plantas principales y 10 plantas de diferentes orígenes se muestran en las Tablas 2 y 3.
3 Discusión
3.1 El método establecido en este artículo se puede utilizar durante 25 minutos en las mismas condiciones cromatográficas.
Tabla 2 Resultados del análisis de 7 alcaloides en diferentes partes de 3 especies de las diez plantas principales (), n=2
Nombre de la planta
Posición p>
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
Ⅶ
Las diez subespecies más meritorias de Kuantabao.
Ganping Wenzhong
(Escuela de Medicina Tradicional China de Sichuan)
Gen
-
0,68
0,05
0,78
Corteza de raíz
0,01
-
1.66
0.14
3.76
Genmu
0.69
0.06
0.84
Corteza del tallo
-
-
0.34
0.05
0.47
Maletero Madera
-
0,53
0,08
0,21
Kumquat. )Fedde: Las diez principales contribuciones de las hojas estrechas
(Instituto de Investigación de Plantaciones Medicinales de Chongqing Nanchuan)
Raíces
0,34
1.17
0.06
1.27
Corteza de raíz
0,98
3,02
0,20
3,54
Genmu
0.18
0.54
0,70
Corteza del tallo
0,29
1,47
0.19
0.41
Madera del tronco
0.28
0,98
0,05
1,36
Adiantum longbract, las diez principales aportaciones de Longbract
( Ebian , Sichuan)
Raíces
0,40
0,62< / p>
1.73
Corteza de raíz
1.10
1.30
6.94
Genmu
-
0.33
< / p>
0.80
0.98
Corteza del tallo
-
0.74
-
0,60
1,24
Madera del tronco
-
-
0.21
-
0.28
0.45
: Componente detectado - : Componente no encontrado Detectado : contenido < 0,01.
Tabla 3 Resultados del análisis de 7 alcaloides en las raíces de las diez principales plantas de los géneros (), n=2
Nombre de la planta
Lugar de producción
p>Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
Ⅶ
Diez contribuciones principales. ) Carl.
Sichuan Emian
0,44
0,78
1,44
Chongqing Fengjie
0,02
0,50
0,64
2,07
Ratthorn anotó 10 puntos, M. bodinieri Gagnep.
Montaña Chongqing Jinfo
0.10
0.81
0,09
0,77
Instituto de Plantaciones Medicinales de Chongqing
0,08
0,79
0,06
1,11
Instituto de Investigación de Medicina Tradicional China de Chongqing
0,41
0,05
0,78
Hunan Xinhua*
0,16
0,53
1,44
Sichuan y Hubei Las diez principales contribuciones. Pachulí
Sichuan Emeishan
-
0,45
0,14
1.10
Sichuan Emian
-
0.82
p>
0.12
1.22
Montaña Chongqing Jinyun
0.35
0.02
0.73
Las diez principales contribuciones de Gan Ping. Ganping Wenzhong
Chongqing Nanchuan
0,01
1,01
0,04
1,58
Escuela de Medicina Tradicional China de Sichuan
-
0,68
0,05
0,78
Kumquat. )Fedde: Diez contribuciones principales de las hojas estrechas
Instituto de Plantación Medicinal de Chongqing
0,34
1,17
0,06
1,27
Monte Emei, Sichuan
0,82
0,06
1,42
Hunan Xinhua*
0,19
0,88
0,07
0,59
M .gracilipes (Oliv)Fedde, Diez contribuciones de tallos delgados.
Sichuan Emeishan
-
0,67
0,15
0,99
Adiantum longbract, las diez principales aportaciones de Longbract
Ebian, Sichuan
0,40
0,62
1,73
Tenia de roca de color amarillo púrpura
Monte Emei, Sichuan
-
0.02
1.05
0.17
0,55
M.polyodota Fedde, uno de los diez principales contribuyentes a polytooth
Monte Emei, Sichuan
-
0,02
0,67
0,10
0,52
Montaña Chongqing Jinfo
-
0.01
0.22
0.13
0,30
M.sp (especie desconocida)
Chongqing Jinfoshan
-
0,01
0.28
1.38
1.30
: Componente detectado -: Componente no detectado: Contenido < 0.01 *: El sitio de medición es el tallo.
Se determinaron los alcaloides ⅰ, ⅱ, ⅴ dibencilisoquinolina y ⅲ, ⅳ, ⅵ, ⅶ protoberberina en las diez principales plantas de diferentes partes y orígenes. Este método tiene buena reproducibilidad, alta precisión y amplio rango de aplicaciones.
3.2 Los diez géneros principales y Berberis son similares en relación genética y composición química. Los resultados muestran que los mismos componentes alcaloides en estos dos géneros pueden determinarse en condiciones cromatográficas de HPLC iguales o similares.
3.3 Entre las 10 plantas, el valor máximo de III fue muy bajo. Según la estructura molecular y el área del pico de ⅳ, ⅵ y ⅶ, se puede concluir que el contenido de ⅲ es inferior a 0,01. Excepto por las diez contribuciones principales de hojas estrechas, el contenido de ⅰ y ⅱ en otras plantas es menor y los picos son más débiles. El pico de V es muy fuerte en la mayoría de las plantas y tiene un alto contenido (en este experimento, debido a la pequeña cantidad de sustancia de referencia, no se realizó la cuantificación).
3.4 La distribución y el contenido de estos siete componentes son diferentes en diferentes partes del género, y el grado de diferencia también es diferente en diferentes especies de plantas. El contenido es básicamente mayor en la corteza de la raíz, seguida de la corteza del tallo, seguida de las raíces y los tallos. En el pasado, los tallos se utilizaban como medicina [1], pero según los resultados del análisis, sus raíces también son un recurso que no se puede ignorar.
Autor: Facultad de Farmacia Lu Guanghua, Universidad de Ciencias Médicas de China Occidental, Chengdu 610044.
Wang Li es el director del Instituto de Plantas Medicinales de la Academia China de Ciencias Médicas del Peking Union Medical College.
Referencia
1Farmacopea China. 1995. Parte I: 68.
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3. Centro de Información de Medicina Tradicional China de la Administración Estatal. Manual de ingredientes activos de fitomedicamentos. Beijing: Editorial Médica del Pueblo, 1986.119, 120, 238, 631, 637, 794, 800.
4Gracias. Estudios farmacológicos y aplicaciones clínicas de la berberina. Revista China de Farmacia Hospitalaria, 1991, 11 (12): 538.
5 Peng Yuangui. Descripción general de los botánicos antiarrítmicos. Medicina herbaria china, 1988, 19 (7): 39
6 Dong, Yao Zong. Estudio clínico de tetrandrina en el tratamiento de la hipertensión. Revista de Medicina Tradicional China y Occidental Integrada, 1991, 11 (2): 87
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10 Chen Chao, Han Hong, Fang Dachao. Efecto protector de la jatrorricina sobre la lesión por isquemia-reperfusión miocárdica en animales de experimentación. Boletín farmacológico chino, 1989, 5 (6): 373.
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