Investigación sobre la tecnología de extracción del polisacárido del hongo Enoki.
Extracción con agua y precipitación de alcohol
Extracción con microondas
Extracción con ácido
Extracción con álcali
Hidrólisis enzimática
Método de ultrafiltración
Método ultrasónico
Extracción con fluido supercrítico
Hay demasiados métodos, ¡déjame darte el más simple! No se pueden publicar fotografías, pero la información está completa.
Extracción y determinación del contenido de polisacáridos del hongo Enoki
Xu Yajie, Ningbo, Wang Leyan, Zhang Jinyu, *Lai Jiafu
(Changchun Vocational and Technical College, Changchun, Jilin 130033)
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El polisacárido del hongo Enoki se extrajo mediante el método de extracción con agua caliente a 70 ℃, se desproteinizó mediante el método sevag, la precipitación gradual con etanol y el contenido de polisacárido se determinó mediante ácido sulfúrico-antrona. método.
Método de contenido. El rendimiento total de polisacáridos determinado por este método es del 0,11 % del peso húmedo de los hongos Enoki. El rango lineal de determinación de polisacáridos es de 1 a 16 μg/ml, que es mayor para los hongos Enoki.
La desviación estándar relativa del contenido de azúcar es inferior al 2,24% y la tasa de recuperación es del 97,6% al 102,8%.
Palabras clave: método de ácido sulfúrico-antrona; polisacárido de Flammulina velutipes; extracto; determinación del contenido
Número de clasificación de la Biblioteca de China: R284.2O629.12 Código de identificación del documento: a.
Extracción y determinación del contenido de polisacáridos de baya de goji
Seta Enoki
Xu Yajie, Ningbo, Wang Lei, Zhang Jinyu, *Lu Jiafu
(Changchun Science and Technology Vocational College, Changchun 130033, China)
Resumen: Este artículo informa sobre la extracción y determinación del polisacárido del hongo enoki. El proceso es: extracción
El hongo enoki. El polisacárido se extrae primero con agua a 70 ℃ y luego se desproteiniza según el método Sevag y luego se precipita fraccionadamente con etanol. Método antrona-ácido sulfúrico para la determinación cuantitativa del contenido de polisacáridos
Método. El rendimiento total de este método es del 0,1,1%, el rango lineal es de 1 ~ 1,6 μg/ml y la desviación estándar relativa no supera el 2,24%.
La tasa de recuperación oscila entre el 97,6 y el 102,8%.
Palabras clave: método antrona-ácido sulfúrico; polisacárido; extracción, linaje de Flammulina velutipes
0 Introducción
Flammulina velutipes es un hongo basidiomiceto.
El hongo es una especie de hongo comestible y medicinal, y su cuerpo fructífero contiene proteínas.
31,2%, grasa 5,8% y VB1, VB2, VC, VPP (crudos
y 10 tipos de aminoácidos.
En la actualidad, los hongos Enoki se han utilizado ampliamente en la industria alimentaria y de condimentos.
En el mercado internacional, el consumo ocupa el segundo lugar después de los hongos y las agujas de metal utilizadas para coser y bordar.
El polisacárido del hongo Enoki. Principal ingrediente activo de los hongos. Ingredientes bioactivos, que se utilizan ampliamente para inhibir tumores, combatir el cáncer y mejorar la inmunidad.
Este experimento utiliza el polisacárido crudo de los hongos Enokitake. extracción con agua y precipitación con alcohol [4]
El contenido de polisacárido se determinó mediante el método colorimétrico de fenol-ácido sulfúrico. Los resultados son los siguientes
Los resultados experimentales mostraron que el contenido de polisacárido era. bueno El método es sencillo y rápido,
altamente sensible y reproducible.
1 Materiales y métodos
1.1 Materiales e instrumentos
1.1.1Materiales y reactivos
Hongos Enoki producidos por Beijing Huaguan Agriculture Co., Ltd.
Solución estándar de glucosa (concentración de masa: 100,0 μg/ml):
Pese con precisión 10,0 mg de glucosa seca hasta peso constante a 65438 ± 005 ℃, disuelta en una cantidad adecuada de agua destilada y transfiérala cuantitativamente a 100 ml.
Ajuste el volumen hasta la marca y agite. bien
Antrona (concentración en masa: 2 mg/mL): Pesar con precisión 10,0 mg de antrona, disolverlos con una cantidad adecuada de ácido sulfúrico concentrado y transferirlo cuantitativamente a
Agitar bien, ahora preparar
Etanol absoluto, nitrógeno, n-Butanol, sulfúrico concentrado ácido. Los reactivos anteriores se utilizan para analizar la pureza.
1.1.2 Instrumento
Espectrofotómetro UV-visible UV-2401, fabricado por Shimadzu, Japón.
Producto; Centrífuga refrigerada de alta velocidad 3-18K, Sigma, Alemania.
Producto; triturador de tejidos, proporcionado por Changzhou Guohua Electric Co., Ltd.; actual
Horno de secado por aire caliente, producto de Shanghai Experimental Instrument Factory tipo GSY-II; p>
Caja de baño de temperatura, producto de Beijing Medical Equipment Factory.
1.2 Método experimental
Pese con precisión 100,00 g de materia prima del hongo Enoki y utilice 300 ml de ácido acético.
El éster etílico se sometió a reflujo a 80°C durante 2 horas, se desgrasó y se destiló 300 ml.
Agua, tritúrelo con un machacador de pañuelos y luego agregue 400 ml de agua destilada
Número 9, 2007
Colocar en una temperatura constante de 70°C. Baño María a temperatura de 4ºC. Lixiviación a una velocidad de 000 r/min durante 4 h.
Centrifugar durante 5 minutos y recoger el sobrenadante. Utilice el método sevag [5], extraiga
Mezcle el líquido con un volumen igual de cloroformo-n-butanol, la proporción de volumen es 4:1, retire la proteína durante la noche,
luego usar un rotavapor. Concentrar a presión reducida a 100 mL, usando 1 vez el volumen.
Precipitar el polisacárido con etanol al 95%, centrifugar y utilizar 2.
Utilizar etanol al 95% para precipitar el polisacárido, centrifugar y tomar el sobrenadante.
Utilice 4 veces el volumen de etanol al 95% para precipitar la solución.
Disolver los precipitados de polisacárido recogidos en todos los niveles y ajustar el volumen a 1.000.
Matraz aforado de mililitros, de repuesto.
2 Principios experimentales
El polisacárido del hongo Enoki se puede deshidratar para generar derivados de glicolaldehído bajo la acción de ácido sulfúrico concentrado.
Bio, reacciona con la antrona para formar un compuesto azul [6], de la misma forma.
Cuantificación colorimétrica de solución estándar de glucosa tratada.
3 Resultados y Discusión
3.1 Elaboración de la curva estándar de glucosa
Pip 0,05, 0,10 y 0,20 soluciones estándar de glucosa respectivamente,
0,30 , 0,40, 0,60, 0,80 ml, colocados en un tubo colorimétrico tapado con
Diluir el agua destilada a 1,0 ml y agitar bien. Luego se añadió antrona por separado para realizar pruebas.
Reactivo 4,0 mL, sumergir rápidamente en baño agua con hielo, agitar bien y enfriar, conectar cada tubo entre sí.
Remojar al baño maría hirviendo durante 10 minutos, sacar, enfriar con agua fría y dejar a temperatura ambiente.
10 min, y medir la absorbancia a una longitud de onda de 620 nm, presionando la misma con 1,0 mL de agua.
La operación de muestra es en blanco, con la concentración de glucosa c como abscisa y absorbancia.
Utilice el valor de grados A620 como ordenada para crear una curva estándar de glucosa.
La curva estándar de glucosa se muestra en la Figura 1.
La ecuación de regresión obtenida es:
A620=0.035 08 C+0.007 41, coeficiente de correlación r=0.999 13.
Los experimentos muestran que cuando la concentración masiva de glucosa es de 1 a 16 microgramos/ml.
El valor de absorbancia tiene una buena relación lineal con la concentración de glucosa.
Departamento.
3.2 Selección y estabilidad del tiempo de reacción
Absorber 1,0 mL de solución problema y añadir 2 mg/mL de concentración en masa.
Para 4,0 ml de reactivo de antrona, el método de funcionamiento es el mismo que para medir la curva estándar.
Mida el valor de absorbancia cada 20 minutos. Los resultados muestran que el valor de absorbancia de la solución medida a los 200 min es estable, RSD=2,64% (n=11).
3.3 Prueba de precisión
Extraiga con precisión 0,5 ml * * 5 porciones de la solución de control y realice de acuerdo con el estándar de medición.
Utilice el mismo método para medir la absorbancia de la curva y la RSD calculada es menor que.
2,24%.
3.4 Determinación del contenido de la muestra
Extraiga con precisión 0,5 ml de solución de muestra, que es la misma que la curva estándar de determinación.
Utilizando este método, se descubrió que el contenido de polisacáridos era el peso húmedo de los hongos Enoki.
0,11%.
3.5 Experimento de tasa de recuperación
Extraiga con precisión 6 porciones de 0,5 ml de solución de muestra y agregue una cierta cantidad a cada una.
Controlar la solución para que su volumen total sea 65438±0,0mL y realizar según el estándar de medición.
Utilice el mismo método para medir la absorbancia de la curva y la tasa de recuperación promedio es del 97,6% al 102,8%.
Los resultados experimentales de la tasa de recuperación se muestran en la Tabla 1.
Materiales de referencia:
Liang Minyi, Feng Jianping, Cai Minyi.. Aislamiento y
Caracterización de inmunomoduladores y agentes antitumorales
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