¿Cómo elegir una columna cromatográfica al realizar cromatografía de gases y cromatografía líquida?
Selección de columna de cromatografía de gases:
Longitud de la columna: aumentar la longitud de la columna puede mejorar el efecto de separación. Sin embargo, la longitud de la columna es demasiado larga, lo que prolonga el tiempo de análisis. Por lo tanto, bajo las condiciones de alcanzar un cierto grado de resolución, se debe seleccionar la columna cromatográfica más corta posible. El diámetro interior de las columnas empaquetadas es generalmente de 3 a 6 mm y el diámetro interior de las columnas capilares es de 0,1 a 0,5 mm.
Selección de la cantidad de fijador: Cuando la superficie del soporte es mayor, se puede utilizar más fijador y el volumen de inyección permitido también aumentará en consecuencia. Sin embargo, se puede ver en el término de transferencia de masa de la ecuación de velocidad que para reducir la resistencia a la transferencia de masa de la fase líquida, el espesor de la película líquida de la solución estacionaria debe ser lo más delgado posible. Sin embargo, si la película de líquido fijador es demasiado fina, el volumen de inyección permitido será menor. Por lo tanto, la cantidad de fijador debe determinarse según la situación específica.
La relación de selección de solución fijadora: (refiriéndose a la relación de masa de solución fijadora y soporte) es generalmente de 5:100 a 25:100. Cuanto mayor sea la superficie específica del soporte, mayor será la proporción de dosificación de fijador.
Selección de la naturaleza y el tamaño de partícula del portador: si el área de superficie específica del portador es grande y la distribución del tamaño de los poros es uniforme, la solución estacionaria se distribuirá fácilmente de manera uniforme, lo que puede acelerar acelerar el proceso de transferencia de masa y mejorar la eficiencia de la columna. Por lo tanto, se debe seleccionar y empaquetar un portador con partículas pequeñas y uniformes de la manera más uniforme posible para reducir la difusión de corrientes parásitas y mejorar la eficiencia de la columna. Sin embargo, si el tamaño de partícula es demasiado pequeño, el llenado no será uniforme, lo que aumentará la caída de presión de la columna y será perjudicial para la operación. Generalmente, para tubos de columna de 4 a 6 mm, es más apropiado utilizar un soporte de malla 60 a 80 o de malla 80 a 100.
SE-30, OV-1, OV-101 dimetilsiloxano no polar DB-l, HP-1, CP-Sil5CB, SPB-1, 007-1, Rtx-1, BP-1. .. ... Hidrocarburos, aminas, fenoles, pesticidas, PCB, aceites volátiles, sulfuros, etc.
SE-54, SE-52 5% fenilo, 1% etileno Metilsiloxano no polar DB-5 , HP-5, CPSil 8CB, SPB-5,, Rtx-5, BP-5... ... fármacos, hidrocarburos aromáticos, fenoles, ésteres, alcaloides, Hidrocarburos halogenados
OV-1701 7 % cianometilo, 7% fenilmetilsiloxano polaridad media DB-1701, HP-1701, BP-10, CPSil 19CB, Rtx-1701, SPB-1701... ...Medicamentos, pesticidas, herbicidas, TMS, azúcar
OV-17 50% Fenilmetilsiloxano medio extremo DB-17, HP-50, SP2250, CP-Sil 19, Rtx-50, SPB-50... ...Medicamentos, pesticidas, esteroides, etc.
PEG-20M Polietilenglicol 20M Polar DB-WAX, HP-Wax, Carbowax SUPELCOWAX10, CPWAX 52CB... ...Alcoholes, ésteres, aldehídos, disolventes, monoaromáticos, aceites esenciales, etc.
FFAP Polietilenglicol 20M ácido tereftálico polaridad del producto de reacción DB- FFAPHP-FFAP Nuk01, SP-1000... ...Alcoholes, ácidos, ésteres, aldehídos, nitrilos
XE-60, 25% cianoetilmetilsiloxano polar ésteres, nitrilos Compuesto base
OV-225 25% cianoetilo, 25% fenilmetilsiloxano medio polar DB, 225, HP-225, SP-2330, SPB-225, CP-SIL43CB Éster ácido de grasa, PUFA, Aldito ]
OV-210 50% trifluoropropilsiloxano polar DB210, Rtx200... ...Compuestos polares, compuestos orgánicos de cloro
OV-275 50% trifluoropropilsiloxano altamente polar DB210, SP2401, Rtx200 ... Compuestos polares,
1. Fijador
Sin polaridad: SE30*, OV101, SE54*
Polaridad media: OV17, XE60*, OV1701*
Polaridad: PEG20M*, FFAP*, DEGS*
2. Diámetro interior de la columna (mm)
La columna 0,2~0,25 tiene alta eficiencia y baja capacidad de carga. y la pequeña pérdida
0,3~0,35 la capacidad de carga es un 60% mayor que la columna de diámetro capilar. Baja eficiencia
0,53~0,6 columna capilar de gran diámetro, la capacidad de carga es similar a la columna empaquetada. la eficiencia total de la columna supera con creces la columna empaquetada y la velocidad de análisis es rápida
3. Longitud de la columna (m)
Las columnas cortas de 10 a 15 metros separan muestras con menos de 10 componentes
Columnas medianas y largas de 20 a 30 metros separan muestras de 10 a 15 componentes
Columnas largas de más de 50 metros separan muestras de más de 50 componentes
IV. espesor de la película (μm)
Película líquida delgada 0,1 ~ 0,2 μm, baja capacidad de carga, compuestos de alto punto de ebullición
Película líquida estándar 0,25 ~ 0,33 μm Análisis de columna capilar estándar general
Película líquida gruesa de 0,5 ~ 1 μm Gran cantidad de cumplimiento, muestras de bajo punto de ebullición
La membrana líquida extra espesa de 1 ~ 5 μm reemplaza las columnas empaquetadas y analiza muestras complejas con puntos de ebullición inferiores a 200 °C
Cromatografía líquida:
La selección de columnas de cromatografía líquida es más complicada. Normalmente uso C18 para experimentos basados en la estructura y propiedades específicas de la muestra. Si el tiempo de retención es demasiado tarde, usaré una columna C8. Básicamente, la cromatografía de fase inversa C8 y C18 habitual resuelve la mayoría de los problemas. A veces, algunas muestras con estructuras especiales también necesitan utilizar columnas de amina, fenilo o nitrilo.
Por supuesto, debido a que la fase móvil de la cromatografía líquida puede ser polar o no polar (fase normal y fase reversa) y también puede usarse como elución en gradiente, la elección de la columna cromatográfica se vuelve complicada a veces. Si la separación de la columna no es buena, es posible que no sea necesario reemplazar la columna y el problema se puede resolver ajustando directamente la fase móvil. Esto es diferente a la cromatografía de gases.