¿A qué debe prestar atención al tomar luciferasa?

Para obtener los mejores resultados de medición, cuando se mide con un medidor de fluorescencia de un solo tubo, el tiempo desde que se mezclan la muestra y el reactivo de medición hasta antes de la medición se debe controlar al mismo tiempo, por ejemplo, dentro de 30 artículos de segunda clase.

Dado que la temperatura afecta la reacción enzimática, la muestra y los reactivos deben alcanzar la temperatura ambiente antes de la medición.

Para garantizar la estabilidad del reactivo de detección de luciferasa, puede tomar alícuotas adecuadas y almacenarlas en la oscuridad para evitar la congelación y descongelación repetidas y la exposición prolongada a temperatura ambiente. En términos generales, si no se divide en alícuotas y se utiliza tres veces (congelación y descongelación tres veces durante el período), no habrá un impacto significativo en los resultados de la medición.

Después de mezclar la muestra y el reactivo de medición, debe esperar 1-2 segundos antes de medir. El tiempo de medición suele ser de 10 segundos y se puede medir durante tiempos más largos o más cortos según la situación, pero es mejor utilizar el mismo tiempo de medición para el mismo lote de muestras.

Para evitar errores causados ​​por diferencias en la eficiencia cuando los plásmidos se transfectan en células, el plásmido del gen indicador de luciferasa Renilla se puede transferir al mismo tiempo como referencia interna y como detección del gen indicador de luciferasa dual. El kit se utiliza para la detección. También puede transferir el plásmido del gen indicador de β-galactosidasa como referencia interna al mismo tiempo y luego utilizar el kit de detección del gen indicador de β-galactosidasa. La muestra obtenida lisando el lisado de células indicadoras en el kit de detección del gen indicador de luciferasa se puede utilizar directamente para la medición en el kit de detección del gen indicador de β-galactosidasa.

Hay muchos factores que afectan la actividad de la luciferasa, como la temperatura, el valor del pH y el contenido de rojo fenol en el medio de cultivo. Tenga en cuenta que la luciferina debe almacenarse en la oscuridad, de lo contrario la luminiscencia se debilitará. .

Por su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables