¿Qué es la desactivación genética?
Cuando se trata de eliminación de genes, primero debe comprender el sistema de edición de genes CRISPR/Cas.
El sistema CRISPR/Cas (repeticiones palindrómicas cortas agrupadas regularmente interespaciadas/Cas) se utiliza ampliamente en la actualidad. El principio del sistema de edición es que el ARNg producido por la transcripción CRISPR media la nucleasa Cas para apuntar a la secuencia objetivo y cortar la secuencia.
Esquema de edición del gen CRISPR/Cas9
(Fuente: Wellcome Trust Sanger Institute, Sanger)
Entonces echemos un vistazo al gen CRISPR/Cas que preguntaste. acerca de Knockout
En el sistema CRISPR/Cas9, el sgRNA (smallguideRNA) reconoce y se une a la secuencia objetivo del gen objetivo, guiando a Cas9 para cortar el sitio de unión, lo que resulta en una rotura de la doble hebra del ADN ( DSB), el cuerpo repara los DSB por sí mismo mediante la unión de extremos no homólogos (NHEJ). Las proteínas involucradas en la reparación a menudo insertan o eliminan varias bases al final del ADN. El gen reparado perderá su función debido a mutaciones. Lograr así la eliminación de genes en el cuerpo.
Finalmente, echemos un vistazo a cómo aplicarlo
Aplicación: establecimiento de líneas celulares con genes desactivados, establecimiento de modelos de enfermedades animales con genes desactivados.
Ventajas técnicas: en comparación con el ARNi, que "derriba" el gen objetivo a nivel de ARNm, el sistema CRISPR/Cas9 provoca la eliminación de la secuencia del gen, silenciando así completamente (es decir, anulando) el objetivo. gene.
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