¿Cuál es la fase estacionaria de la cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa y cuál es la fase móvil?

La fase estacionaria de la cromatografía líquida de alta resolución de fase inversa es un disolvente no polar. Una fase estacionaria común es el gel de sílice unido a octadecilo. La fase móvil es un disolvente polar. acetonitrilo.

La cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa es un sistema de cromatografía líquida compuesto por una fase estacionaria no polar y una fase móvil polar. Es exactamente igual que el sistema de cromatografía líquida compuesto por una fase estacionaria polar. y un sistema de cromatografía líquida débilmente polar (cromatografía en fase normal) es lo contrario.

La fase estacionaria típica de RP-HPLC es gel de sílice unido con octadecilo, y las fases móviles típicas son metanol y acetonitrilo. La RP-HPLC es el modo de separación más importante de la cromatografía líquida en la actualidad y se puede utilizar para la separación de casi todas las sustancias orgánicas que se pueden disolver en disolventes polares o débilmente polares. La cromatografía de fase inversa es adecuada para separar compuestos iónicos, polares o no polares, y la mayoría de las tareas analíticas se completan mediante cromatografía de fase inversa.

Información ampliada

El principio de la cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa:

En la cromatografía en fase unida de fase inversa, se forma una fase estacionaria unida no polar. usado . Es un portador de gel de sílice en partículas completamente poroso (o de capa delgada) que se hace reaccionar con un reactivo de silanización que contiene una cadena ligera (C4, C8, C18) o un grupo fenilo después del tratamiento de activación ácida para generar un portador de gel de sílice no poroso con un grupo alquilo o un grupo fenilo en la superficie. Como el n-octilo, un hidrocarburo de cadena lineal que está unido de forma valente al portador.

En cuanto al mecanismo de separación de la cromatografía de fase reversa, el mecanismo de la cromatografía de adsorción cree que la retención de solutos en la fase estacionaria es principalmente hidrófoba, lo que también se denomina solvofóbico en la cromatografía líquida de alta resolución. Según la teoría solvofóbica, cuando las moléculas de soluto entran en la fase móvil polar, ocupan el espacio correspondiente en la fase móvil y desplazan a algunas moléculas de disolvente.

Cuando las moléculas del soluto son empujadas por la fase móvil y entran en contacto con la fase estacionaria, la parte no polar o el factor no polar de las moléculas del soluto empujarán la película de disolvente adherida a la fase no polar. -Fase estacionaria polar y contacta directamente con la fase estacionaria. Los grupos funcionales alquilo en la fase estacionaria no polar se combinan (adsorben) para formar un complejo de asociación, formando una capa de adsorción de una sola molécula.

Esta adsorción solvofóbica es reversible. Cuando la polaridad de la fase móvil disminuye, la repulsión solvofóbica disminuye, se produce la disociación y las moléculas del solto se liberan y eluyen.

Enciclopedia Baidu: cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa