Contenido de la investigación sobre farmacología de la medicina tradicional china
Bases de diseño y requisitos para los principales estudios farmacodinámicos de la farmacología de la medicina tradicional china (1)
La medicina tradicional china tiene las características de ingredientes complejos y una amplia gama de efectos farmacológicos. En el diseño experimental se debe seleccionar la principal farmacodinamia que pueda reflejar la esencia de su efecto terapéutico en función de las indicaciones (enfermedades o síndromes) del nuevo fármaco y en referencia a sus funciones. Los exámenes auxiliares que confirman indirectamente su eficacia pueden seleccionarse según corresponda y priorizarse. Por ejemplo, un nuevo medicamento para tratar la artritis reumatoide (artritis reumatoide) debe probarse principalmente en la inflamación de las articulaciones inmunes, la inmunidad celular y los efectos analgésicos, especialmente la artritis inmune como máxima prioridad. Si el nuevo fármaco no tiene ningún efecto inhibidor sobre la inflamación secundaria de la artritis por colágeno tipo II (normalmente se utiliza en su lugar un adyuvante incompleto), será inútil por muy obvios que sean los resultados de otras pruebas. Además, la prueba de eficacia principal debe demostrarse desde múltiples aspectos, se deben seleccionar al menos dos o más modelos para su confirmación y la prueba general debe ser la principal. Requiere métodos experimentales confiables, tecnología avanzada, operaciones estandarizadas y resultados creíbles.
(2) Métodos experimentales seleccionados
Los métodos experimentales farmacológicos se dividen principalmente en experimentos in vivo y experimentos in vitro. Ambos se complementan y pueden estudiar la eficacia de las nuevas medicinas tradicionales chinas desde diferentes ángulos y profundidades. Ambos métodos tienen sus propias ventajas.
Los experimentos in vitro incluyen órganos, tejidos, células, enzimas, receptores, información intracelular y genes in vitro. Puede controlar estrictamente las condiciones experimentales según sea necesario y tiene las ventajas de una buena repetibilidad, una dosis baja y un ahorro de animales. Y puede eliminar la interferencia de varios factores complejos, como nervios y fluidos corporales en el cuerpo, y puede observar directamente y obtener resultados precisos. Los resultados son fáciles de analizar. En el desarrollo de nuevas medicinas tradicionales chinas de las categorías 1, 5 y 7, debido a la menor cantidad de impurezas, se pueden utilizar ciertas pruebas in vitro. Sin embargo, al realizar experimentos in vitro, es necesario estimar completamente el impacto de las impurezas y las propiedades físicas y químicas en la preparación cruda de la medicina tradicional china en los resultados experimentales, como la interferencia del valor del pH de la solución medicinal, varios electrolitos y taninos. Los resultados obtenidos a menudo no pueden reflejar la eficacia clínica. Por ejemplo, las medicinas chinas con fuertes efectos antibacterianos en tubos de ensayo a menudo no necesariamente muestran fuertes efectos antibacterianos en el cuerpo. Algunas medicinas chinas contienen grandes cantidades de iones de potasio e iones de calcio, y sus preparaciones biológicas tienen una actividad farmacológica obvia en el músculo liso aislado y miocardio en el baño de Maxwell, pero es posible que no tenga el efecto correspondiente después de la administración oral.
Las pruebas in vivo, también conocidas como pruebas in vivo, están cerca del estado clínico y son adecuadas para una investigación integral. Los resultados obtenidos son creíbles y pueden reflejar directamente la eficacia clínica. La medicina tradicional china se basa en el sistema ideológico general y concede gran importancia al macrocontrol. La medicina tradicional china tiene las características de múltiples componentes y múltiples objetivos, y la prueba general puede reflejar de manera integral los efectos del medicamento. En particular, es necesario enfatizar que 2 nuevas medicinas tradicionales chinas y 6 preparaciones compuestas, la mayoría de las cuales son preparaciones crudas, se basan principalmente en pruebas in vivo. Para demostrar que un nuevo fármaco tiene un determinado efecto farmacológico, se debe demostrar su eficacia mediante experimentos in vivo. Las pruebas in vitro sólo desempeñan un papel de apoyo. Para métodos de prueba específicos, consulte los libros de metodología relevantes. El método de prueba farmacológica en suero de la medicina tradicional china es un nuevo método de prueba in vitro que ha surgido en los últimos años. Después de administrar el fármaco de prueba por vía oral a los animales, su suero se utiliza como fuente del fármaco y se añade al sistema de reacción in vitro para estudiar sus efectos farmacológicos. Aunque este método todavía tiene muchos problemas por resolver, es de gran valor para las pruebas in vitro de preparaciones crudas de la medicina tradicional china. Estrictamente hablando, utilizar el método de prueba de farmacología sérica requiere una gran cantidad de pruebas preliminares para encontrar el mejor régimen de dosificación. El régimen de dosificación incluye la dosis, los tiempos de dosificación diarios, el tiempo de dosificación continua, el tiempo de extracción de sangre después de la dosificación y las condiciones de inactivación de las sustancias activas relevantes en el suero. Basándose en los datos farmacocinéticos de una gran cantidad de ingredientes activos de la medicina tradicional china en los últimos años, Li propuso el siguiente método general: el fármaco de prueba se administra dos veces al día durante 3 días consecutivos y la sangre se extrae 1 hora después de la última administración. ; la dosis es clínicamente igual. Según este plan general, teóricamente más del 80% de los ingredientes de la medicina tradicional china o sus compuestos alcanzarán o se acercarán al valor máximo 1 hora después de la administración. Las sustancias activas del suero interfieren con la acción de los fármacos y cómo eliminar esta interferencia es un problema muy complejo. Generalmente, es el método más sencillo para eliminar la actividad enzimática y la interferencia del complemento, normalmente durante 30 minutos. Pero no puede enumerarse como regla general. Debido a diferentes factores de interferencia, las condiciones para liberar la interferencia serán muy diferentes.
(3) Seleccionar modelos animales e indicadores
No basta con estudiar los efectos de los fármacos en animales normales, también se deben preparar varios modelos patológicos animales, porque los modelos patológicos simulan enfermedades. Estado, que está más cerca del estado funcional del paciente que los animales normales. Algunos efectos farmacológicos no se pueden observar en animales normales, como medicamentos contra el daño de la mucosa gástrica, medicamentos antibacterianos, antivirales, medicamentos contra tumores malignos, antipiréticos, analgésicos y anti. -fármacos inflamatorios, etc. Por tanto, los modelos patológicos desempeñan un papel importante en la investigación de nuevos fármacos. La selección de modelos patológicos debe basarse en modelos animales que se ajusten a síndromes o enfermedades clínicas de la MTC. Si se estudia el impacto de los tónicos en la función inmune, primero se debe elegir un modelo de síndrome de deficiencia con función inmune baja. Según el principio de diferenciación y tratamiento de síndromes de la medicina tradicional china, "la deficiencia se repone". Todos los pacientes con deficiencia de qi tendrán una función inmune baja y el uso de medicamentos tónicos puede mejorar su función inmune. Además, según el tipo de fármaco, se selecciona el modelo patológico correspondiente.
Por ejemplo, los nuevos medicamentos para tratar la deficiencia de bazo deben elegir modelos animales de deficiencia de bazo, y los nuevos medicamentos para tratar la deficiencia de sangre deben elegir modelos animales de deficiencia de sangre. Sin embargo, todavía es difícil crear un modelo patológico que simule completamente las enfermedades o síndromes de la MTC. Los modelos existentes están lejos de los síntomas clínicos, por lo que los modelos patológicos comúnmente utilizados en medicamentos químicos generales se utilizan a menudo en la investigación de nuevas medicinas tradicionales chinas, como la hipertensión, la diabetes, los accidentes cerebrovasculares, las enfermedades coronarias, la hepatitis, la cirrosis y otros modelos patológicos. Los indicadores de observación deben seleccionarse con fuerte especificidad, alta sensibilidad, buena reproducibilidad, indicadores objetivos, cuantitativos o semicuantitativos para la observación. Por ejemplo, al estudiar la eficacia de las nuevas medicinas tradicionales chinas en el tratamiento de la enfermedad coronaria y la angina de pecho, existen muchos métodos para elegir al preparar modelos de isquemia miocárdica. Entre ellos, el modelo de isquemia miocárdica localizada causada por la oclusión de la arteria coronaria en minicerdos o perros está más cerca de la realidad clínica y es más razonable. Puede localizar, evaluar cuantitativa, cualitativamente y con precisión el efecto terapéutico, y puede usarse como el modelo experimental preferido. .
(4) La investigación farmacodinámica de diferentes tipos de nuevos fármacos requiere experimentos farmacológicos. Los principales estudios farmacodinámicos de las nuevas medicinas tradicionales chinas 1-5, 6 y 7 deberían confirmar su farmacodinamia principal y sus efectos terapéuticos auxiliares más importantes en múltiples aspectos. Entre ellos, los nuevos medicamentos de las categorías 1, 5 y 7 contienen menos impurezas y su eficacia debe demostrarse a un nivel técnico más alto mediante diversos métodos de prueba in vitro e in vivo. 6 compuestos de la medicina tradicional china y 11 preparaciones de medicinas patentadas chinas con estándares nacionales están exentos de pruebas farmacodinámicas importantes.
(5) Animales de experimentación
a) Los animales de experimentación deben seleccionarse razonablemente de acuerdo con los requisitos específicos de diversas pruebas, y su especie, cepa, sexo, edad, peso y estado de salud. , condiciones de alimentación, origen animal y número de certificado, y registrarlos detalladamente.
b) Seleccionar animales de experimentación cuya estructura, función, metabolismo y características patológicas sean similares a las del cuerpo humano. Por ejemplo, se deben seleccionar palomas, perros, gatos y otros animales para la investigación de fármacos eméticos. Estos animales son más sensibles al vómito y no se deben utilizar conejos y ratas porque estas últimas no tienen un centro de vómito ni respuesta al vómito; Por ejemplo, la investigación sobre fármacos antihipertensivos debe elegir perros, gatos y ratas, que son sensibles a los fármacos antihipertensivos y cercanos a los humanos, no se deben elegir conejos porque su presión arterial es inestable y son insensibles a algunos fármacos.
c) Seleccionar animales de experimentación con antecedentes genéticos claros, indicadores estables y significativos, y características anatómicas y fisiológicas que cumplan con los requisitos del propósito experimental.
d) Es recomendable seleccionar 2-3 animales para las pruebas de eficacia del fármaco. Los modelos animales son diferentes de la práctica clínica, especialmente los modelos de síndrome de MTC, por lo que el "asentimiento animal" puede no ser clínicamente eficaz. Los humanos y los animales son * * y diferentes. Sería más fiable si los resultados mostraran una eficacia clínica similar en diferentes especies de animales. Por lo tanto, no es necesario seleccionar un solo animal para los estudios farmacodinámicos. Los resultados experimentales con 2 o 3 animales son más fiables.
e) Además, también se debe considerar la raza, cepa y calidad de los animales de experimentación, y si los animales de prueba son fáciles de obtener, económicos, fáciles de criar y manejar.
(6) Se debe prestar atención a las siguientes cuestiones cuando se trata de los requisitos para los medicamentos inspeccionados:
a) Los materiales medicinales chinos inspeccionados deben ser identificados por expertos en farmacognosia para determinar las variedades, orígenes y usos medicinales y épocas de recolección. Se debe fijar el método de preparación de las piezas de decocción.
b) Las condiciones del proceso de producción de los preparados de la medicina tradicional china deben seleccionarse estrictamente y seleccionarse las mejores condiciones de proceso. La calidad de los preparados debe ser calificada, estable y controlable, y la forma farmacéutica y los estándares de calidad deben ser básicamente los mismos que los utilizados clínicamente. Se pueden seleccionar extractos de hierbas medicinales chinas sin excipientes para realizar pruebas de eficacia.
c) Las prescripciones de los seis tipos de preparaciones compuestas de la medicina tradicional china deben ser fijas, los ingredientes de las prescripciones deben cumplir con los estándares legales y las fórmulas deben cumplir con la teoría de la medicina tradicional china. Para las fórmulas que combinan la medicina tradicional china y occidental o que contienen materiales medicinales naturales, se debe realizar un análisis de la fórmula.
d) Además, las nuevas preparaciones de la medicina tradicional china deben cumplir con los estándares de salud, y la fuente y el número de lote de las preparaciones deben ser los mismos.
(7) Grupo de control
a) El grupo de control normal, también conocido como "grupo de control en blanco" o "grupo de control negativo", se refiere a la observación y el control en condiciones normales. El tratamiento del grupo de control normal debe ser el mismo que el del grupo de administración de fármacos, como administración intragástrica con disolventes comunes e inyección con suero fisiológico. El propósito de establecer un grupo de control normal puede ser observar si el modelado es exitoso bajo la acción del fármaco y observar si los indicadores del grupo de administración del fármaco vuelven a la normalidad.
b) Grupo de control positivo de drogas. El grupo de control positivo de medicamentos puede elegir la medicina tradicional china o la medicina occidental registrada en la farmacopea y aprobada oficialmente para su producción. Si se trata de una medicina tradicional china se deberá indicar el número de aprobación y su función. La medicina occidental puede elegir fármacos clásicos y reconocidos en función del objetivo de la prueba. Por ejemplo, en los ensayos antiinflamatorios se suelen utilizar corticosteroides o analgésicos antipiréticos. Los analgésicos incluyen sutondina, aspirina, morfina, etc. La medicina tradicional china debe ser básicamente coherente con las indicaciones, la eficacia y la vía de administración del nuevo fármaco que se está probando. Se pueden utilizar 1 o 2 fármacos de control positivo en cada prueba y se pueden seleccionar 1 o 2 dosis diferentes de cada fármaco positivo. El objetivo del establecimiento de medicamentos de control positivo es comparar las características, potencia y velocidad de acción de nuevos medicamentos; el segundo es verificar la confiabilidad y precisión de los métodos e indicadores utilizados; Por esta razón, se deben obtener resultados positivos para los fármacos positivos; de lo contrario, hay motivos para dudar de la fiabilidad de los métodos e indicadores seleccionados.
c) Excepto por no consumir drogas, el grupo de control modelo recibió el mismo tratamiento que el grupo de administración de drogas. Como se mencionó anteriormente, para confirmar el efecto de los fármacos, a menudo es necesario establecer modelos animales de enfermedades y síndromes, por ejemplo, para observar los fármacos antipiréticos y los efectos antipiréticos de los fármacos antipiréticos, es necesario preparar ratas o; Modelos de fiebre del conejo. Para observar el efecto de los fármacos activadores de la sangre, es necesario preparar varios modelos de síndrome de estasis sanguínea. Sólo observando los efectos de los fármacos en los modelos animales correspondientes se puede reflejar verdaderamente la eficacia clínica.
Como se mencionó anteriormente, un experimento farmacodinámico generalmente requiere de 5 a 6 grupos experimentales, y cada grupo generalmente contiene de 10 a 14 animales (ratas o ratones). Asegúrese de prestar atención a la aleatoriedad del peso y el sexo de los animales al agruparlos. Cuando es necesario realizar experimentos en lotes, se debe prestar atención a las operaciones paralelas entre los animales de cada grupo. A menudo es necesario repetir los experimentos farmacodinámicos importantes. Por ejemplo, es necesario repetir tres veces los efectos patógenos de los fármacos antitumorales y también los experimentos para reducir el azúcar en sangre. Si la reproducibilidad del efecto principal es escasa, el desarrollo de este fármaco no tiene futuro.
(8) Posología y vía de administración
Debido al bajo contenido de ingredientes activos en las nuevas preparaciones de compuestos de la medicina tradicional china y a la baja biodisponibilidad oral, es difícil establecer una dosis- relación de efecto en la farmacología de la medicina tradicional china. Según los requisitos técnicos, los principales ensayos de eficacia de varios fármacos nuevos deberían tener al menos tres grupos de dosis. Los animales grandes, como perros y monos, se pueden dividir en dos grupos de dosis, pero el número de animales en cada grupo no es inferior a 6. Para las nuevas medicinas tradicionales chinas 1, 5 y 7 de alta pureza, se deben lograr en la medida de lo posible relaciones dosis-efecto y tiempo-efectividad.
a) Diseño de dosificación: El diseño de dosis razonable juega un papel importante en el diseño de la eficacia del fármaco. Partiendo de la premisa de que los materiales están calificados y los modelos y métodos son confiables, los resultados de las pruebas dependen en gran medida de si el diseño de dosis es razonable.
b) Tiempo de administración: se refiere principalmente al curso clínico de medicación, analgésicos, antipiréticos y fármacos para el tratamiento del resfriado. Algunos ciclos de tratamiento son cortos, no más de 3 a 5 días, y el tiempo de administración debe ser corto. Es mejor ver el efecto inmediatamente después de una administración. Los medicamentos nutritivos, los medicamentos para prevenir y tratar enfermedades geriátricas deben tomarse durante mucho tiempo. Dado que la medicina tradicional china tiene un efecto lento y suave, a menudo se utiliza junto con el modelado. Si se inyecta D-galactosa por vía subcutánea para preparar un modelo de rata o ratón que simule el envejecimiento, el modelado y la dosificación suelen tardar entre 42 y 50 días.
(9) Capacidades y métodos de gestión
a) Capacidad de dosificación: debe ser adecuada. Si la capacidad es demasiado pequeña, es fácil cometer errores si es demasiado grande. , los animales no pueden soportarlo. Generalmente, la capacidad de dosis máxima es la siguiente: los ratones no pueden dejar de beber agua durante 12 a 16 horas y el peso corporal no debe exceder los 0,4 ml/10 g de inyección subcutánea (Sc), inyección intraperitoneal (ip) e inyección intravenosa; (iv) no debe exceder los 0,5 ml/animal. Las ratas no pueden dejar de beber agua durante 12 a 16 horas. La dosis a la vez es generalmente de 1 a 2 ml/100 g de peso corporal, y la dosis máxima no excede los 5 ml/animal por inyección intraperitoneal; no exceder 1 ml/animal; la inyección intramuscular es de 0,4 ml/solamente. Dosis máxima para conejos y gatos: 20 ml/vez mediante sonda nasogástrica, 2 ml/vez mediante inyección subcutánea e intramuscular, 5 ml/vez mediante inyección intraperitoneal y 10 ml/vez mediante inyección intravenosa.
b) Modo de administración: administración preventiva, administración terapéutica o una combinación de prevención y tratamiento. La medicación preventiva generalmente se administra unos días antes de la prueba para permitir que el medicamento alcance una concentración efectiva en el cuerpo para observar el efecto preventivo del medicamento. Está más en línea con la práctica clínica crear primero un modelo animal y luego administrar el medicamento. fármaco para observar el efecto terapéutico del fármaco. Para las nuevas medicinas tradicionales chinas que tienen un inicio lento, efectos leves y una duración corta, a menudo es difícil lograr los resultados esperados y sólo se puede adoptar una administración preventiva. Algunos experimentos a menudo adoptan una combinación de prevención y tratamiento, como los experimentos antiinfecciosos in vivo, es decir, después de unos días de administración, inoculación de agentes infecciosos, la administración continúa durante unos días para observar el efecto antiinfeccioso de Nuevas medicinas tradicionales chinas.
(10) Expresión y análisis estadístico de resultados experimentales
Tanto los resultados experimentales cuantitativos como cualitativos deben expresarse en tablas. Esto es diferente de un trabajo de investigación, que puede expresarse en diagramas en lugar de tablas. Sin embargo, los datos de la investigación sobre la eficacia de nuevos medicamentos deben estar en una tabla y explicarse con datos experimentales obtenidos de estadísticas específicas. Si cree que la tabla de datos no es lo suficientemente clara, puede utilizar los dibujos adjuntos para explicarla con más detalle. Los métodos estadísticos comúnmente utilizados son los siguientes:
a) Datos cuantitativos: también llamados datos de reacción cuantitativos, pueden expresarse mediante diferencias cuantitativas, como presión arterial, producción de orina, temperatura corporal, valores bioquímicos en sangre, etc. . El método de prueba t se usa comúnmente para análisis estadístico entre grupos.
b) Datos cualitativos: También llamados datos de respuesta cualitativos, sólo existen dos tipos de respuestas a las drogas: muerte o inmortalidad, convulsiones o sin convulsiones. Los resultados de las pruebas suelen expresarse como porcentajes. La prueba de chi-cuadrado se puede utilizar para análisis estadístico.
c) Datos graduados: también llamados datos de medición ordenados, por ejemplo, datos de duración del efecto del fármaco clasificados por grado, datos de grado patológico, datos de eficacia clínica agrupados por grado (recuperado, marcadamente eficaz, mejorado, no válido, etc.) .). Estos datos no son adecuados para el análisis estadístico utilizando el método anterior. Los métodos de análisis estadístico no paramétrico comúnmente utilizados incluyen el método de suma de rangos, el método Ridit, etc.
Descripción del listado de resultados estadísticos. El contenido de la hoja de datos suele incluir el grupo experimental, la dosis, el número de animales en cada grupo, los datos del indicador y la significancia de los resultados estadísticos. Finalmente, el líder de la prueba debe estar familiarizado con el contenido y los resultados de la investigación, revisar el contenido y organizar los materiales de acuerdo con la tabla, y prestar atención para evitar errores de texto y datos al escribir los materiales. La investigación farmacológica se puede dividir en tres categorías, a saber, farmacología primaria, farmacología secundaria y farmacología de seguridad. Además, es posible que se requieran estudios farmacológicos de seguridad complementarios y de seguimiento según los requisitos experimentales. La investigación farmacológica general se refiere a la investigación farmacológica con una amplia gama de farmacodinamia primaria, incluida la farmacodinamia secundaria y la farmacología de seguridad, y estudia los efectos farmacológicos de nuevos medicamentos en ciertos sistemas de órganos importantes, además de la farmacodinamia primaria. Su propósito es identificar, a través de estudios farmacológicos generales, efectos inesperados de los medicamentos en sujetos de prueba que puedan estar relacionados con la seguridad humana, evaluar reacciones adversas a los medicamentos y/o efectos fisiopatológicos observados en estudios toxicológicos y/o clínicos; y/o efectos fisiopatológicos observados en estudios y/o mecanismos hipotéticos de reacciones adversas al medicamento.
A través de la investigación farmacológica general, puede proporcionar referencia para el diseño de pruebas de toxicidad a largo plazo, proporcionar información para la investigación clínica y la medicación segura, y proporcionar información para el desarrollo de nuevas indicaciones. Sólo 1 a 5, 6 y 7 nuevos medicamentos chinos y compuestos de la medicina china que contienen hierbas medicinales tóxicas deben realizar investigaciones en esta área; otras categorías están exentas de informar. La investigación farmacológica general incluye principalmente el sistema nervioso central, el sistema cardiovascular y el sistema respiratorio.
(1) Principios básicos de la investigación en farmacología general
a) Gestión de pruebas: la farmacología de seguridad en la investigación en farmacología general debe seguir generalmente las "Buenas prácticas de gestión de calidad para la investigación de medicamentos no clínicos". (BPL) implementación.
b) Diseño experimental: El diseño experimental debe cumplir con los principios básicos de aleatoriedad, comparabilidad y repetibilidad.
(2) Contenidos básicos de la investigación farmacológica general.
a) Sujetos: Los sujetos en estudios farmacológicos generales deben representar completamente a los sujetos de ensayos clínicos y a los medicamentos comercializados. Por lo tanto, los sujetos deben utilizar sujetos con procesos de preparación estables y cumplir con los requisitos de los estándares de calidad de los ensayos clínicos que generalmente utilizan muestras piloto. muestras, e indicar el nombre del sujeto, fuente, número de lote, contenido (o especificaciones), condiciones de almacenamiento y método de preparación. Si no se utiliza una muestra piloto, debería haber una buena razón. Si la dosis o el método de administración son limitados, el principio activo (extracto) se puede utilizar para realizar pruebas. El disolvente o excipiente utilizado en la prueba debe estar etiquetado con el número de lote, la especificación y el fabricante.
b) Sistema de prueba: Para obtener información farmacológica general científica y válida, se debe seleccionar el animal u otro sistema de prueba más apropiado. Los factores al seleccionar un sistema de prueba incluyen la respuesta farmacodinámica del sistema de prueba, las características farmacocinéticas del sujeto de prueba, la especie, cepa, sexo y edad del animal de prueba, la sensibilidad, sensibilidad y reproducibilidad del sistema de prueba, y los antecedentes de la información del sujeto de prueba. Deben explicarse las razones para seleccionar animales/modelos y sistemas de prueba concretos.
①Animales de experimentación de uso común: ratones, ratas y perros se utilizan comúnmente como animales de experimentación. Los experimentos suelen realizarse con animales conscientes. Los ratones y las ratas deben cumplir con los requisitos del Nivel 2 y superiores del Estándar Nacional para Animales de Laboratorio, y los perros deben cumplir con los requisitos del Nivel 1 y superiores del Estándar Nacional para Animales de Laboratorio. Si se utilizan animales anestesiados, se debe prestar atención a la elección del fármaco anestésico y a la profundidad de la anestesia.
②Sistemas de prueba in vitro de uso común: los sistemas in vitro se pueden usar para respaldar la investigación (como estudiar las características de actividad de la sustancia que se está probando y el mecanismo de acción farmacológico observado en las pruebas in vivo). Los sistemas de detección in vitro comúnmente utilizados incluyen principalmente: tejidos de órganos in vitro, células, orgánulos subcelulares, receptores, canales iónicos y enzimas.
c) Número de muestra y comparación: Para interpretar científica y significativamente los datos de las pruebas, el número de animales y muestras in vitro en las pruebas farmacológicas generales debe ser suficiente. El número de ratones y ratas en cada grupo generalmente no es inferior a 10, y el número de perros generalmente no es inferior a 6. En el diseño experimental se deben considerar controles en blanco y negativos razonables, y se deben establecer controles positivos cuando sea necesario.
d) Vía de administración: La vía de administración es coherente con la vía clínicamente recomendada. Si se utilizan diferentes vías de administración, se deberán indicar los motivos.
e) Dosis o concentración
Estudios in vivo de reacciones adversas a medicamentos: Los estudios farmacológicos generales in vivo deben intentar determinar la relación dosis-efecto y la relación tiempo-efecto de las reacciones adversas ( (como el tiempo de aparición y respuesta de las reacciones adversas), establezca al menos tres grupos de dosis. El grupo de dosis baja debe ser equivalente a la dosis farmacodinámica principal eficaz, y el grupo de dosis alta debe ser mayor que el grupo principal de dosis farmacodinámica alta para evitar reacciones tóxicas graves. Estudios in vitro: Los estudios in vitro deben intentar determinar la relación dosis-efecto de la sustancia de prueba. La concentración límite superior del objeto de prueba no debe afectar las propiedades físicas y químicas del sistema de prueba y otros factores especiales que afectan la evaluación tanto como sea posible.
f) Frecuencia de dosificación y tiempo de medición: Generalmente se debe utilizar una sola dosis. Si los efectos farmacológicos del fármaco de prueba solo aparecen después de un período de tratamiento, o existen problemas de seguridad en los resultados de estudios no clínicos y ensayos clínicos después de múltiples dosis, el número de dosis en los estudios farmacológicos generales debe diseñarse razonablemente en función de estos efectos. El momento para probar los parámetros farmacológicos generales debe seleccionarse en función de las características farmacodinámicas y farmacocinéticas de la sustancia de prueba.
g) Indicadores de observación: en función de la importancia de los sistemas tisulares y las funciones vitales, se pueden seleccionar sistemas tisulares relevantes para la investigación farmacológica general. El objetivo de la investigación farmacológica general es estudiar los efectos de las sustancias de prueba en las funciones vitales. El sistema cardiovascular, el sistema respiratorio y el sistema nervioso central son sistemas importantes para mantener la vida, y las observaciones generales de estos sistemas deben completarse en experimentos farmacológicos generales antes de la práctica clínica. Cuando se observan o especulan algunas reacciones adversas en humanos y animales en otros ensayos no clínicos y ensayos clínicos, se deben complementar y completar estudios más profundos sobre sistemas importantes anteriores o estudios sobre otros sistemas de tejidos antes de solicitar una licencia de producción.
h) Resultados y análisis: basándose en registros de pruebas detallados, realizar análisis cuantitativos y cualitativos de los resultados y explicar los métodos estadísticos específicos y los motivos de la selección. Al mismo tiempo, se debe prestar atención a la evaluación de los resultados de las pruebas individuales. Analizar los efectos farmacológicos generales de la sustancia de prueba basándose en resultados estadísticos, sopesar los pros y los contras y analizar las perspectivas de desarrollo de la sustancia de prueba en combinación con los resultados de otras pruebas de seguridad, pruebas de eficacia y pruebas de control de calidad.