Conocimientos sobre la recolección y procesamiento de muestras de sangre en pruebas de química clínica.

El propósito de las pruebas clínicas es proporcionar una base de diagnóstico experimental precisa y confiable para uso clínico. Para garantizar la confiabilidad de los datos experimentales, la medicina de laboratorio debe cumplir con una gestión de calidad total. Se refiere al control de calidad de todos los factores y vínculos que afectan la confiabilidad de los resultados de las pruebas clínicas) y al control de calidad de todo el proceso (se refiere al control de calidad y la gestión de calidad de todo el proceso de trabajo experimental). El siguiente es el conocimiento que les aporto sobre la recolección y el procesamiento de muestras de sangre para pruebas de química clínica. Bienvenido a leer.

1. Definición de muestras de sangre para pruebas de química clínica

Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se refieren a una cierta cantidad de sangre extraída para completar uno o más elementos de la prueba de química clínica, incluidos los anticoagulados. y no anticoagulados.

En segundo lugar, el uso de muestras de sangre

(1) Toma de partes

1. Extracción de sangre venosa: el método de extracción de sangre más utilizado. Las venas más utilizadas son la vena antecubital y la vena dorsal del carpo, y la vena yugular y la vena bregma a veces se utilizan en niños y recién nacidos.

2. Extracción de sangre arterial: utilizada principalmente para análisis de gases en sangre. Las arterias comunes incluyen la arteria femoral, la arteria braquial, la arteria radial y la arteria umbilical.

3. Extracción de sangre capilar: adecuada para experimentos o para bebés que solo requieren una pequeña cantidad de sangre. Los sitios comunes son los lóbulos de las orejas y las yemas de los dedos y, a veces, el dedo gordo y el talón en los niños. La profundidad de punción de la aguja de extracción de sangre debe ser de 2 mm (

(2) Tipo de muestra

Las muestras de sangre para pruebas de química clínica se dividen en suero, plasma y sangre completa. El suero y el plasma se comúnmente utilizado en la práctica clínica, excepto el primero Excepto por la ausencia de fibrinógeno, la sangre completa se usa solo cuando su composición de glóbulos rojos es similar a la del plasma. La sangre completa se usa para análisis de gases en sangre y electroforesis de hemoglobina, pero no para análisis de gases en sangre y electroforesis de hemoglobina. Análisis de química clínica general.

3. La sangre completa se considera suero o plasma.

Las muestras de sangre deben recolectarse lo antes posible para permitir la separación natural del suero (plasma) y la sangre completa. en contacto con células sanguíneas, generalmente dentro de las 2 horas posteriores a la extracción de sangre. El procesamiento de sangre completa se divide en tres etapas: antes de la centrifugación, durante la centrifugación y después de la centrifugación. etapa de centrifugación

Es decir, un período de tiempo antes de recoger y centrifugar el libro índice

1. Generalmente, se debe dejar que la muestra se aglutine por sí sola antes de la centrifugación. y los coágulos de sangre no se pueden quitar con un palo de madera. Por lo general, las muestras de sangre deben recolectarse a temperatura ambiente (22 ~ La aglutinación espontánea completa se puede lograr colocándola a 25°C durante 30 a 60 minutos. La reacción de aglutinación de muestras refrigeradas. es lento; agregar un coagulante acelerará la aglutinación (después de recolectar la muestra, se debe invertir y agitar suavemente de 5 a 10 veces para asegurar el efecto del coagulante.

2). Si se requieren muestras de plasma, se deben usar tubos de recolección de muestras de sangre que contengan anticoagulantes. Inmediatamente después de la recolección de sangre, los tubos de recolección de sangre se deben invertir y mezclar suavemente de 5 a 10 veces (para garantizar la función anticoagulante), el plasma se puede separar en 5. a 10 minutos

3. Refrigeración de las muestras: la refrigeración de las muestras puede inhibir el metabolismo celular y estabilizar algunos componentes que dependen de la temperatura. Sin embargo, las muestras de sangre completa generalmente no se pueden refrigerar. no exceder las 2 horas La detección de catecolaminas, pH/gases en sangre, amoníaco, ácido láctico, piruvato, gastrina y hormona tiroidea en sangre requiere muestras frías (2~ 8oC), la muestra debe colocarse en cubitos de hielo o una mezcla de. Hielo y agua inmediatamente después de sacarlo (no se permiten cubitos de hielo grandes). La muestra debe estar completamente en contacto con el refrigerante para garantizar que el refrigerante alcance la altura de la muestra.

4. y conservantes: algunos aditivos pueden inhibir el metabolismo celular y prevenir cambios en la concentración del analito cuando se almacenan muestras de sangre. Al medir el azúcar en sangre, si se agrega fluoruro de sodio a la sangre, la glucosa se puede almacenar a 22 ~ 25 °C de forma estable durante 24 horas. y 48 horas a 2 ~ 8 ° C sin aislar las células sanguíneas. Sin embargo, debido al alto hematocrito de los recién nacidos y los niños, es difícil controlar la glucólisis de las células de oxalato de formaldehído con fluoruro de sodio. El conservante anticoagulante no es adecuado para la sangre. determinación de glucosa; la mezcla de fluoruro de sodio y timol no es adecuada para la determinación enzimática porque inhibe la actividad enzimática.

5. Ubicación de la recolección de muestras: (1) Las muestras deben enviarse al laboratorio lo antes posible después de la recolección, especialmente. cuando la temperatura en el área de recolección excede los 22oC (2) Después de recolectar las muestras de sangre, los vasos sanguíneos deben taparse y colocarse verticalmente con la boca del tubo hacia arriba para reducir la vibración del contenido del tubo y promover la coagulación completa. y evitar la evaporación, la contaminación y las salpicaduras de la muestra.

(3) Las muestras de sangre recolectadas deben manipularse con cuidado para evitar que la hemólisis causada por el balanceo del tubo de muestra afecte los resultados de la medición. Los elementos que tienen un impacto grave (aumento del rendimiento) incluyen: lactato deshidrogenasa, aspartato aminotransferasa sérica, potasio sérico y hemoglobina; los elementos que tienen un impacto significativo incluyen: hierro sérico (?), alanina aminotransferasa sérica (?) y tiroxina sérica (? ); levemente afectados (aumentados) son: proteína total, albúmina, fósforo sérico, magnesio sérico, calcio sérico, fosfatasa ácida (4) Exposición de analitos sensibles a la luz a luz artificial o bajo luz solar (ultravioleta); ¿Como VA, VB6? -Al medir caroteno, porfirina, bilirrubina, etc. , el tubo de muestra debe envolverse en papel de aluminio o material similar para protegerlo.

6. Transporte de muestras: Las muestras de sangre completa deben transportarse desde el punto de recolección de sangre al laboratorio lo antes posible. Si la distancia de transporte es larga, especialmente porque la estabilidad del analito se ve afectada, el suero o plasma se puede separar en el punto de extracción de sangre y enviarse al laboratorio si es necesario; se debe prestar atención al embalaje, los requisitos de temperatura y los métodos de manipulación; etc. Estabilidad de la muestra durante el transporte para garantizar la estabilidad de los componentes analizados durante el transporte, el tubo de muestra debe mantenerse cerrado y colocado verticalmente hacia arriba;

7. Aceptación de muestras de laboratorio y preparación para la centrifugación: (1) Mantenga registros de aceptación de muestras (verifique la lista cuidadosamente durante la inspección, registre cuidadosamente la información relevante y firme para la aceptación y el procesamiento de muestras); las muestras deben clasificarse y prepararse para la centrifugación; (3) Después de que el laboratorio acepte la muestra, el tubo de la muestra aún debe mantenerse sellado, con la boca del tubo hacia arriba y colocado verticalmente. Después de retirar el tapón, la pérdida de CO2 en la sangre hará que el valor del pH aumente y que el calcio ionizado y la fosfatasa ácida disminuyan. En particular, el cambio en el valor del pH afectará la precisión de algunos resultados de la prueba. (4) El tiempo de coagulación de la muestra debe ser suficiente; las muestras de sangre que contengan anticoagulantes se pueden centrifugar inmediatamente; las muestras que contengan coagulantes se pueden centrifugar entre 5 y 15 minutos después de la extracción de muestras de sangre entera anticoagulada (para la determinación de zinc y litio); , protoporfirina, etc.) ) no se pueden centrifugar; (5) Las muestras refrigeradas (2~8oC) deben mantenerse a esta temperatura hasta que estén listas para la centrifugación. Se recomienda utilizar una centrífuga con temperatura controlada; (6) Antes de la centrifugación, no se recomienda utilizar pequeños palos de madera o equipos similares para despegar los coágulos adheridos a las paredes y tapones del tubo de ensayo. El pelado manual puede inducir hemólisis. Si necesitas exponer la pared del tubo de ensayo o quitar el tapón, debes tener mucho cuidado y hacerlo con cuidado.

(2) Etapa de centrifugación

Es decir, el indicador ha estado colocado en la centrífuga durante un periodo de tiempo.

1. Tiempo de centrifugación y fuerza centrífuga relativa (RCF): al centrifugar muestras de sangre en análisis de química clínica, ¿cuál es la RCF (1000~1200)? g, el tiempo de centrifugación es 5~65438±00min.

2. Centrifugación con temperatura controlada: el calor generado durante el proceso de centrifugación no favorece la estabilidad de los analitos. Se debe utilizar una centrífuga con temperatura controlada al centrifugar muestras de sangre para análisis químicos clínicos. Algunos analitos que dependen de la temperatura (como la hormona adrenocorticotrópica, el monofosfato de adenosina cíclico, las catecolaminas, etc.) deben separarse a 4oC para los analitos sin requisitos especiales de temperatura, la temperatura de centrifugación debe establecerse en 20oC ~ 22oC cuando la temperatura es inferior a 15oC; , puede aumentar artificialmente el valor medido del potasio sérico. Las muestras enviadas refrigeradas deben centrifugarse a la temperatura requerida.

3. Centrifugar nuevamente: Es mejor centrifugar la muestra una vez. Si es necesario volver a centrifugar, el intervalo de tiempo desde la última centrifugación debe ser muy corto. Las muestras de sangre que contengan sustancias separadas no deben centrifugarse nuevamente.

(3) Etapa post-centrifugación

Se refiere al periodo de tiempo posterior a la centrifugación y antes de extraer una determinada cantidad de suero o plasma para su detección.

1. La separación del suero o plasma de las células sanguíneas y coágulos sanguíneos debe completarse lo antes posible (dentro de las 2 horas) después de la extracción de sangre.

2. Almacenamiento del suero o plasma separado: La temperatura ambiente del laboratorio y la temperatura y tiempo de almacenamiento del suero o plasma son parámetros importantes para la estabilidad del analito y la precisión de los resultados de la medición. (1) El suero o plasma no debe almacenarse a 22 °C ~ 25 °C durante más de 8 horas; (2) Si el experimento no se puede completar en 8 horas, el suero o plasma debe almacenarse a 2 oC ~ 8 oC ( 3) No se puede almacenar dentro de las 48 horas. Los proyectos experimentales completados, o el suero o plasma separado que deba almacenarse durante más de 48 horas, deben almacenarse a -20oC (4) Las muestras no deben congelarse ni descongelarse repetidamente (solo una vez); y no debe almacenarse en un refrigerador protegido de las heladas (lo que puede causar cambios en la temperatura de la muestra (5) El suero en el gel (barrera de gel) separado después de la centrifugación se puede almacenar de 2 a 5 días; se debe garantizar la integridad del gel; sin embargo, cuando se utilizan sustancias de separación que no son geles, se debe eliminar el suero o el plasma inmediatamente después de la centrifugación.

(6) El suero o el plasma deben almacenarse en tubos de ensayo sellados.

IV.Sustancias de separación de suero o plasma

Se refiere a sustancias que separan el suero o plasma de la sangre total, incluidas las sustancias gel y las sustancias no gel.

(1) Sustancia en gel

¿Es una sustancia en gel inerte con viscosidad específica y gravedad específica (la gravedad específica entre suero o plasma y coágulo), como (1000 ~ 1100)? La centrifugación con GRCF durante 10 minutos forma una barrera de gel impermeable entre el suero o plasma y el coágulo de sangre, separando así el suero o plasma de las células sanguíneas y el coágulo de sangre con los que entra en contacto.

(2) Material no gel

Consta de perlas, discos, filtros, tapones de fibra y otros materiales inertes (vidrio, plástico, fibra, fieltro, etc.). ) Use una sustancia con una gravedad específica entre suero o plasma y coágulo, y agréguela suavemente al vaso sanguíneo. ¿Uso (1000 ~ 1100)? Cuando el gRCF se centrifuga durante 10 minutos, puede moverse a través de la sangre entre el suero o plasma y las células sanguíneas y los coágulos sanguíneos, formando una interfaz que permite separar el suero o plasma.

(3) Sistema completo de tubos de gel

El sistema consta de tubos de extracción de sangre al vacío (tubos de plástico siliconados), que contienen sustancias de gel inertes, aceleradores o anticoagulantes. Tenga en cuenta que el producto debe tener la certificación de rendimiento y la fecha de caducidad correspondientes, y debe utilizarse correctamente dentro de su fecha de caducidad.

Con la mejora de los métodos de inspección, la aplicación generalizada de instrumentos automatizados de alta precisión, la gestión científica de la inspección y la mejora continua del nivel técnico del personal de inspección, los factores que influyen y las interferencias en el proceso de inspección han aumentado. se ha reducido significativamente y la inspección analítica Los diversos factores de influencia o factores de interferencia en el pasado han aumentado relativamente. La medicina de laboratorio moderna ha impuesto requisitos más estrictos para la retención y recolección de muestras de prueba. Los pacientes también deben comprender los conocimientos básicos sobre la retención de muestras, cumplir con las asignaciones y cooperar con el personal del laboratorio para que los resultados de las pruebas sean más precisos y confiables.

Las muestras habituales para exploración ambulatoria incluyen generalmente sangre (sangre, sangre venosa), orina, heces, líquido cefalorraquídeo, derrame pleural, ascitis, líquido prostático, semen, secreciones vaginales, etc. Existen ciertos requisitos para el tiempo, el método y la conservación de estas muestras.

Precauciones en la recogida de muestras

1. Muestras de sangre

Intentar evitar la influencia de factores fisiológicos. Algunos factores fisiológicos, como el tabaquismo, la dieta, el ejercicio, los cambios de humor, el embarazo, la posición del cuerpo, etc., afectarán los cambios de ciertos componentes en la sangre, y algunos incluso cambian de día y de noche. Las condiciones bajo las cuales se recolectan las muestras de sangre deben ser lo más consistentes posible. Si es inevitable, este factor debe indicarse en la muestra.

1. Sangre periférica

Generalmente, la sangre se recoge del interior del dedo anular de la mano izquierda, no debe haber congelación, inflamación, edema o lesión en esta parte. Si esta pieza no cumple con los requisitos, reemplácela con otra pieza de dedo. En el caso de pacientes quemados, la sangre se puede extraer de la piel intacta. Debido a que algunos análisis de sangre de rutina (como el recuento de glóbulos blancos, la clasificación, etc.) fluctúan mucho debido a factores fisiológicos, las condiciones deben ser lo más consistentes posible. No se deben tomar fármacos anticoagulantes y procoagulantes para las pruebas de función de la coagulación (como recuento de plaquetas, tiempo de sangrado o tiempo de coagulación, etc.). ) para evitar afectar los resultados de la medición.

2. Sangre venosa

Además de diversos elementos como la hemostasia y la detección de trombos, también se requiere plasma sanguíneo venoso anticoagulante. En la actualidad, el suero sanguíneo venoso se puede utilizar directamente para el análisis y la detección de la mayoría de los elementos de prueba. Entre los elementos de prueba del suero, algunos (como el azúcar en sangre, los lípidos en sangre, etc.) se ven muy afectados por la dieta y los factores diurnos y nocturnos. Generalmente, las muestras de sangre en ayunas por la mañana son más adecuadas. Algunas muestras se descomponen rápidamente en la sangre (como la actividad de ACP, etc.) y su actividad disminuye cuando se almacenan a 0 ~ 4 ℃. La detección de estos elementos debe ser oportuna y rápida, y algunos (como la creatina quinasa, etc.) se ven muy afectados por factores como el ejercicio. También es muy importante evitar la hemólisis durante las extracciones de sangre, especialmente al medir el potasio y la LDH. No extraiga sangre de la vena del mismo lado de la infusión para realizar diversas pruebas.

En segundo lugar, las muestras de orina

Las muestras de orina, al igual que las muestras de sangre, también se ven muy afectadas por factores como la dieta, el ejercicio y la dosis de medicamentos, especialmente la dieta, por lo que la orina de la mañana generalmente es mejor. que la orina aleatoria. La orina de la mañana se refiere a la primera muestra de orina después de levantarse por la mañana. Ha sido concentrada y acidificada, y los componentes formados (como células sanguíneas, células epiteliales y objetos tubulares) están relativamente concentrados para su observación. La micción voluntaria significa orinar a voluntad. Es conveniente hacerlo, pero se ve muy afectado por la dieta, el ejercicio y los medicamentos, y es propenso a resultados falsos positivos y falsos negativos, como la proteinuria dietética, la diabetes dietética y la vitamina C que interfieren con lo oculto. resultados de sangre. La orina posprandial (orina recolectada 2 horas después del almuerzo) es adecuada para el examen del azúcar en la orina, las proteínas en la orina y el urobilinógeno.

En este momento, las muestras de orina pueden aumentar la sensibilidad de la prueba y detectar lesiones menores. El recuento de células de la orina de 12 horas, es decir, Addis (toda la orina recogida después de vaciar la vejiga desde las 8 de la noche anterior hasta las 8 del día siguiente), porque lleva mucho tiempo y las bacterias pueden multiplicarse fácilmente, por lo que es necesario agregar el conservante formaldehído.

Cuantificación de sustancias químicas en orina de 24 horas (toda la orina recogida tras vaciar la vejiga desde las 8:00 horas del primer día hasta las 8:00 horas del segundo día), incluyendo proteínas, azúcar, calcio. , etc. . , detectar diferentes sustancias y elegir diferentes conservantes para la conservación. La orina limpia de la sección media se utiliza principalmente para el cultivo bacteriano de orina, que requiere esterilidad y se toma una muestra después del lavado. Todas las muestras de orina deben recolectarse en un volumen suficiente, al menos 12 m1, preferiblemente 50 ml, y todas las muestras de orina deben recolectarse con regularidad. En el caso de las pacientes femeninas, se debe evitar la contaminación de las muestras de orina con secreciones vaginales y sangre menstrual.

3. Muestras fecales

La detección de muestras fecales tiene un importante valor de referencia para juzgar enfermedades del sistema digestivo. Al recolectarlas, es necesario seleccionar heces que contengan componentes patológicos anormales, como moco, pus y sangre, y tener etiquetas limpias. Para las heces que parecen normales, se deben tomar muestras de la superficie, la profundidad y la punta. Se deben recolectar heces durante 24 horas para buscar parásitos y contar huevos. Los trofozoítos de la disentería amebiana deben controlarse inmediatamente después de la defecación, y se deben tomar muestras de lugares con pus, sangre y heces blandas y mantenerlas calientes para su examen.

Al comprobar si hay huevos de Schistosoma japonicum, se deben extraer moco, pus y sangre. Cuando los miracidios eclosionen, se deben extraer al menos 30 g de heces y procesarlas lo antes posible. Para comprobar si hay huevos de oxiuros, utilice un hisopo de membrana transparente para limpiar los pliegues alrededor del ano a las 12 p.m. o antes de defecar por la mañana, y realice un examen microscópico inmediatamente. Prueba de sangre oculta (método químico), no se permite carne ni alimentos que contengan sangre animal durante 3 días antes de la prueba, y está prohibida la recolección de hierro y vitamina C. Todas las muestras de heces deben examinarse dentro de la hora siguiente a su recolección para evitar que las enzimas digestivas y el pH destruyan los componentes visibles.

4. Muestras de líquido cefalorraquídeo

Las muestras de líquido cefalorraquídeo se enviarán para su examen inmediatamente después de su recolección. Si se deja por mucho tiempo, afectará los resultados de la prueba: como la degeneración y destrucción de las células, lo que provocará fallas en el recuento y la clasificación; algunas sustancias químicas, como la glucosa, reducirán el contenido de descomposición y la autólisis bacteriana afectará la tasa de detección de bacterias; Después de extraer el líquido cefalorraquídeo, generalmente se instalan tres tubos estériles. El primer tubo se usa para cultivo bacteriano, el segundo tubo se usa para análisis químico y examen inmunológico, y el tercer tubo se usa para caracterización general y examen microscópico. El orden de los tres tubos no se puede invertir. Debido a que las muestras son difíciles de recolectar, se debe tener cuidado durante todas las inspecciones y pruebas.

5. Muestras de líquido torácico y ascítico

Al igual que las muestras de líquido cefalorraquídeo, las muestras recolectadas deben ser seguras y enviarse para su examen de manera oportuna. Generalmente, se divide en tres tubos, uno para citología de rutina, otro para examen bioquímico y otro para cultivo bacteriano. El orden es el mismo que para el líquido cefalorraquídeo.

6. Muestras de líquido prostático

Recoger muestras de líquido prostático después del masaje prostático. Cuando la cantidad de líquido sea pequeña, déjela caer directamente sobre el portaobjetos para una inspección oportuna. Se debe tener cuidado para evitar la evaporación de la muestra. Cuando la cantidad sea grande, se deberá recoger en un tubo de ensayo limpio y seco. Si no se puede masajear el líquido prostático, se puede comprobar el sedimento de orina después del masaje.

7. Muestras vaginales secretas

Se deben prohibir las relaciones sexuales, el baño, el examen abierto, el lavado abierto y la medicación tópica 24 horas antes de la recogida de muestras vaginales. Los instrumentos utilizados para el muestreo deben limpiarse. Generalmente, se toma un hisopo de algodón empapado en solución salina de la vagina o de la parte posterior de la curva vaginal y el cuello uterino, y se toma un frotis de solución salina para observar la muestra de secreción. Las pacientes femeninas que menstrúan no deben examinar muestras de secreción vaginal.

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