¿Qué impacto tienen el abridor de boca de rata experimental y el abridor de boca de rata experimental en el experimento?
Estudio experimental sobre el establecimiento de un modelo animal de cistitis infecciosa en ratas mediante la implantación transuretral de un catéter
El establecimiento de un modelo animal de cistitis en ratas es útil para el desarrollo de diversos fármacos bioquímicos a base de hierbas chinas. El medicamento es eficaz para el tratamiento de la cistitis y observar los posibles efectos adversos de estos medicamentos es de gran importancia. En este estudio, se creó un modelo animal de cistitis infecciosa en ratas implantando un cuerpo extraño en la vejiga de ratas SD hembra e instilando líquido de Escherichia coli. El informe es el siguiente.
1 Materiales y métodos
1.1 Materiales y agrupamiento experimental: 63 ratas SD adultas hembras, peso individual (170±10) g, criadas en jaulas separadas, con libre acceso al agua; divididos aleatoriamente Hubo tres grupos, 21 animales en cada grupo: grupo experimental (una infusión de cuerpo extraño humano Escherichia coli en la vejiga), grupo de infusión de Escherichia coli y grupo de infusión de solución salina normal. No hubo diferencias estadísticamente significativas en el peso corporal de las ratas en cada grupo al comienzo del experimento (Pgt; 0,05). Utilice solución DH5α E. coli (108-9 UFC/100 ul) para la instilación en la vejiga.
1.2 Producción de modelos animales: A las ratas del grupo experimental se les inyectó por vía intraperitoneal una solución de barbital sódico de 2 ppi (hidrato de cloral 10 a 0,3 ml/100 g) 0,3 ~ 52, y los ratones redondos se fijaron a 4 m. , se desinfectó el orificio uretral con etanol al 70% y tintura de yodo, se sumergió una guía de metal blando de cabeza redonda con un diámetro de 1,4 mm en glicerina estéril y luego se insertó en la vejiga de la rata a través de la uretra y el otro extremo de la El cable se colocó en un catéter de polietileno de 6 a 8 mm de largo, luego coloque el tubo de empuje. Utilice el tubo de empuje para empujar el catéter hacia la vejiga a lo largo del cable guía y déjelo en su lugar. alambre guía, vacíe la vejiga de orina e inhale 0,5 ml de solución de E. coli en la jeringa. Después de inyectar la vejiga en la vejiga a través del tubo de empuje, el procedimiento se completa sacando el tubo de empuje. Después de utilizar el mismo método de anestesia en el grupo de infusión de Escherichia coli y en el grupo de infusión de solución salina normal, se insertaron tubos humanos de longitud seleccionada (tubos PE50) en las vejigas de las ratas a través de la uretra, después de vaciar la orina, se inyectaron 0,5 respectivamente; ml de solución de Escherichia coli y 0,5 ml de solución salina fisiológica, repetir el método tipo P una vez por tres veces y elevarlos libremente en las mismas condiciones.
1.3 Indicadores de observación: Las ratas fueron sacrificadas después de 12 días, se hizo una incisión en la cavidad abdominal, se sacó la vejiga y se abrió, el grupo experimental observó si el catéter de cuerpo extraño permanecía, untó la pared interna de La vejiga con un hisopo de algodón esterilizado para cultivo bacteriano, y se cortó. Parte del tejido de la vejiga se tiñó con hematoxilina y eosina (tinción HE) y se cortaron en secciones patológicas. Se colocaron bajo un microscopio para observar la infiltración de células inflamatorias en la vejiga. lámina propia de la mucosa de la vejiga y si hubo alguna anomalía en la capa muscular de la vejiga.
1.4 Métodos estadísticos: Los datos se analizaron estadísticamente utilizando el software SPSS 17.0. Los datos de medición se expresaron como media ± desviación estándar (± s) y los datos de recuento se expresaron como tasa (). Se utilizó la prueba x, Plt; 0,05 se considera una diferencia estadísticamente significativa.
Resultados
2.1 Comparación del peso corporal de las ratas y la mortalidad al final del modelado: Al final del experimento, no murió ninguna rata en cada grupo y no hubo una diferencia estadísticamente significativa. en el peso corporal entre las ratas de cada grupo (Pgt; 0,05). En el grupo experimental, 1 caso de catéter intravesical se descargó espontáneamente.
2.2 Comparación de secciones patológicas convencionales entre grupos: A través de la observación de secciones patológicas, 18 casos en el grupo experimental mostraron signos de cistitis infecciosa, con evidente edema y engrosamiento de la mucosa, y una gran cantidad de inflamación mononuclear en la mucosa y el estroma se observaron infiltración celular, agregación en almorranas y congestión capilar y hemorragia; 6 casos en el grupo de infusión de Escherichia coli tuvieron infiltración de células inflamatorias en la lámina propia de la mucosa de la vejiga, y el grado de lesiones fue más leve que eso. en el grupo experimental, en el grupo de solución salina normal, excepto 3 casos con intrínseco Hubo una leve infiltración de células inflamatorias en el epitelio de la mucosa de la vejiga, y el otro epitelio de la mucosa de la vejiga era básicamente normal. Hubo 18 casos de cistitis en el grupo experimental. En comparación con el grupo de infusión de Escherichia coli (6 casos) y el grupo de infusión de solución salina normal (3 casos), la diferencia fue estadísticamente significativa (Plt; 0,01).
2.3 Comparación de los resultados del cultivo de Escherichia coli entre grupos: 16 casos de cultivo de Escherichia coli en el grupo experimental fueron positivos en vejiga, en comparación con el grupo de perfusión de Escherichia coli (8 casos) y el grupo de perfusión salina normal (1 caso), la diferencia fue estadísticamente significativa (Plt; 0,01).
3 Discusión
En la actualidad, la literatura nacional y extranjera informa que los modelos animales de cistitis en ratas se dividen en dos tipos: estériles e infecciosas. Los métodos de producción más utilizados incluyen la inyección intraperitoneal, la instilación vesical y la intervención quirúrgica. La diferencia radica en el efecto del fármaco en su conjunto y localmente. Los modelos de cistitis elaborados mediante diversos métodos tienen sus propias ventajas y desventajas.
El método de inyección intraperitoneal se suele utilizar para crear modelos animales de cistitis estériles. La operación es simple: la solución de ciclofosfamida se inyecta en la cavidad abdominal una vez cada 3 días. La tasa de éxito del modelado es alta. Después de 3 administraciones, la tasa de éxito del modelado es del 90%. puede llegar a 5 días después del modelado. Hasta 80, lo que está relacionado con la toxicidad sistémica de la ciclofosfamida en ratas. La inyección intraperitoneal se absorbe a través del peritoneo y sus metabolitos actúan sobre la vejiga y varios órganos del cuerpo, provocando una sobreestimulación de la vejiga y daño a otros órganos. Puede usarse para investigaciones a corto plazo o in vitro sobre la patología y la etiología de la vejiga. motilidad.
El método de instilación en la vejiga puede establecer un modelo de cistitis estéril o infectada. El proceso es un poco complicado. Los agentes de infusión más utilizados incluyen ciclofosfamida, sulfato de protamina, Escherichia coli, etc. Después de la anestesia, el fármaco se instila desde la uretra en la vejiga de la rata. Durante la anestesia, el fármaco actúa directamente sobre el tejido de la vejiga, lo que puede hacer que permanezca en la vejiga para mantener una alta concentración y tenga poco impacto. en otros órganos, las ratas orinan de forma autónoma cuando están despiertas y excretan la mayoría de los fármacos, lo que da como resultado una baja tasa de éxito en el modelado (alrededor de 50).
Generalmente existen dos tipos de métodos quirúrgicos para hacer modelos de cistitis infecciosa: ① Incidir la cavidad abdominal para exponer la vejiga y realizar una incisión adicional en la vejiga o suturar el cuello de la vejiga según las necesidades experimentales. el modelado de esta manera es 100, pero la tasa de mortalidad de ratas con infección secundaria puede alcanzar 701R 5 a 7 días después de la cirugía; ② El modelo de cistitis infecciosa se estableció mediante intervención transuretral, HeeYoun Kim et al. insertado en la uretra y fijado a la vagina con suturas En la pared, se estableció un modelo de uretritis. El erudito japonés Yuichi Kurosaka et al. establecieron un modelo de cistitis infecciosa implantando un tubo de polietileno en espiral de 2 cm de largo en la vejiga de ratas a través de la uretra. Sin embargo, el experimento encontró que la uretra de las ratas hembra tenía 2 cm de largo y un diámetro delgado. y curvado en espiral es muy difícil de operar para los humanos y puede dañar fácilmente la uretra, lo que dificulta su popularización.
Este grupo de experimentos adopta un método de intervención transuretral, que se ha mejorado sobre la base de Yuichi Kurosaka y otros. El método es el siguiente: se inyectan por vía intraperitoneal 2 0,3 ~ 0,5 ml de solución de pentobarbital sódico. rata, y el diámetro. Se sumergió un alambre guía de metal blando de cabeza redonda de 1,4 mm en glicerina estéril y se insertó en la vejiga de la rata a través de la uretra. El otro extremo del alambre guía se colocó en un catéter de polietileno de 6 a 8 mm de largo y 2 mm de diámetro. y luego coloque el tubo de empuje (diámetro 3 mm), empuje el catéter hacia la vejiga a lo largo del cable guía y déjelo allí, saque el cable guía, vacíe la vejiga, inhale 0,5 ml de solución de E. coli en el tubo. Jeringa, inyéctela en la vejiga a través del tubo de empuje y luego extráigala. Empuje el tubo para completar el proceso de modelado.
En este experimento, a 21 ratas hembra se les implantaron catéteres humanos en la vejiga a través de la uretra. El proceso de operación fue simple. Ninguna rata murió después de que se creó el modelo. Las ratas fueron sacrificadas 12 días después de la operación. La cistitis ocurrió en el examen de biopsia patológica en 18 casos, la tasa de incidencia alcanzó 85,7, en comparación con 6 casos en el grupo de infusión de Escherichia coli y 3 casos en el grupo de infusión de solución salina normal, las diferencias fueron estadísticamente significativas (Plt; 0,o1); El caso no desarrolló cistitis debido a la descarga del catéter y en los otros 2 casos se desconocía la causa.
El análisis del mecanismo de la cistitis infecciosa es el siguiente: Escherichia coli inyectada a través de la uretra se adhiere a la superficie del catéter y forma un foco de infección persistente: la placa. La actividad del catéter en la vejiga estimula. y daña la mucosa de la vejiga, causando infección.
El proceso de implantación del catéter en este experimento es simple. Solo una inyección de líquido de E. coli puede lograr una alta tasa de éxito. Este experimento proporciona un método simple y altamente factible para la producción por lotes. Modelos animales de cistitis infecciosa.