¡Muchas gracias por encontrar un experto en inglés para traducir los pasos del análisis HPLC!
Tome muestras de 1 ml de las muestras de análisis de azúcar y ácido orgánico después de 4, 8 y 12 horas respectivamente. Las muestras se extrajeron con etanol al 95% saturado con pentosas (de acuerdo con la normativa estándar interna).
Después de mezclar y centrifugar, el sobrenadante se inyectó en SepPak C18 (waters Company, Milford, MA, EE. UU.) y la columna se lavó con metanol. El azúcar se extrajo con 5 ml de metanol y luego con 5 ml de agua. Se equipó un sistema HPLC 600 de Waters Company con una columna Ion 33 e Interaction de 300 mm × 7,8 mm (Mandel Scientific Co., St. Laurant, QC, Canadá) utilizando ácido sulfúrico 0,005 N como fase móvil y un monitor de reflectancia Waters 410. (Millipore, Milford MA, EE. UU.) y un detector de matriz de fotodiodos Waters 996 para analizar lactosa, glucosa, galactosa, estaquiosa, rafinosa, sacarosa, fructosa, acetato y lactato. Los picos se identificaron utilizando estándares establecidos. Las muestras se obtuvieron de tres fermentaciones independientes. Los datos obtenidos se compararon con los obtenidos de productos no fermentados.