Colección de citas famosas - Frases motivadoras - ¿Qué kit se utiliza generalmente para extraer ADN libre de células en suero?

¿Qué kit se utiliza generalmente para extraer ADN libre de células en suero?

Kit de extracción de ADN a base de sangre

Pasos de operación:

, volumen de sangre completa, pasos de operación: lt; 400ul de sangre completa, 300ul de volumen de procesamiento de sangre

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1. Agregar 2,5 veces el volumen de Solución A a 300ul de sangre anticoagulante. Mezclar por inversión y centrifugar a 12000 rpm durante 1 minuto. Desechar el líquido.

2. 1 nuevamente y deseche el líquido

3. Prepare la mezcla de Solución B y Solución C de acuerdo con la tabla adjunta en la página 3 (consulte la tabla adjunta para conocer la dosis de la Solución B y la Solución C)

4. Agregue 150 ul de la solución mezclada y pipetee uniformemente durante 60 °C. Incubar en un baño de agua o incubadora durante 10 minutos. Durante el período de incubación, invierta y mezcle la solución de rojo a amarillo verdoso o marrón.

5. Agregue un volumen igual de alcohol isopropílico y mezcle bien hasta que se vuelva filamentoso o floculante. Centrifugue durante 1 minuto y deseche el líquido transparente.

6. Centrifugar durante 1 minuto a 12000 prm y usar una pipeta para eliminar el líquido transparente y secar a temperatura ambiente durante 10 ~ 15 minutos.

7. o durante la noche, disuelva el ADN y pipetee uniformemente. Guarde el conjunto de ADN base a -20 °C

2. Procedimiento para medir sangre completa: 1 ~ 10 ml de volumen de sangre Ejemplo de volumen de procesamiento de sangre de 3 ml

1. Agregar 2,5 veces el volumen de Solución A a 3 ml de sangre anticoagulante. Mezclar por inversión y centrifugar a 3000 rpm durante 5 minutos. Desechar el líquido.

2. /p >

3. Prepare la mezcla de Solución B y Solución C de acuerdo con la tabla adjunta en la página 3 (consulte la tabla adjunta para conocer la dosis de la Solución B y la Solución C)

4. ml de la solución mezclada con pipeta de 1 ml. Incubar en un baño de agua a 60 °C o en una incubadora durante 10 minutos con una pipeta o pipeta de plástico. Durante el período de incubación, invertir y mezclar la solución de rojo a amarillo verdoso o marrón.

5. Agregue un volumen igual de alcohol isopropílico, mezcle bien y mezcle bien el ADN básico filamentoso o floculante.

6. Utilice una pipeta para transferir el flóculo a un tubo EP de 1,5 ml con 800 ul de 75. alcohol invierta a 12000 prm y centrifugue durante 3 minutos. Deseche y seque a temperatura ambiente durante 10 a 15 minutos.

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7. Disuelva el ADN durante la noche y pipeteelo uniformemente. Guarde el ADN básico a -20 °C.

3. Mida los pasos de sangre total: 10 ~ 20 ml de volumen de sangre, ejemplo de volumen de procesamiento de sangre de 10 ml.

1. Añadir 2,5 veces el volumen de Solución A a 10 ml de sangre anticoagulante, invertir y mezclar, centrifugar a 8000 rpm durante 5 minutos y desechar la solución;

2. Repetir el paso 1 y desechar el líquido. p>

3. Prepare una mezcla de Solución B y Solución C de acuerdo con la tabla adjunta en la página 3 (consulte la tabla adjunta para conocer las cantidades de uso de la Solución B y la Solución C);

4. Agregue 5 ml de la solución mezclada y pipetee uniformemente con una pipeta de plástico. Incube en un baño de agua a 60 °C o en una incubadora durante 10 minutos. Durante el período de incubación, invierta y mezcle hasta que la solución cambie de rojo a amarillo verdoso o marrón. /p>

5. Agregue un volumen igual de alcohol isopropílico. Llene, invierta y mezcle hasta que haya ADN de base filamentoso o floculante;

6. tubo de 800ul 75 de alcohol. Invierta el tubo a 12000prm e incube durante 1 minuto. Deseche y aclare a temperatura ambiente. Seque durante 10 a 15 minutos;

7. durante 10 a 15 minutos o durante la noche para disolver el ADN. Utilice una pipeta o una pipeta de plástico para distribuir uniformemente y almacenar el conjunto de bases de ADN a -20 °C

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