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Explicación de los términos de la prueba de aglutinación

Materiales y reactivos Tomemos como ejemplo la reacción de aglutinación en placa de la brucelosis.

1. Placas de vidrio, pipetas graduadas, etc.

2. Antígeno de aglutinación en placa de Brucella, suero positivo estándar de Brucella. Método de operación 1. Tome una placa de vidrio limpia, márquela en cuadrados con un lápiz de vidrio e indique el número del suero a analizar. 2. Tome una pajita de 0,2 ml y chupe 0,08 ml, 0,04 ml, 0,02 ml y 0,01 ml respectivamente en un cuadrado. Para pruebas a gran escala, sólo se pueden utilizar dos volúmenes de suero, 0,04 ml y 0,02 ml para animales grandes, y 0,08 ml y 0,04 ml para animales pequeños y medianos. Se requiere una pajita nueva para cada muestra analizada.

3. Agregue 0,03 ml de antígeno de aglutinación en placa de Brucella en cada célula y colóquelo cerca del suero sin entrar en contacto con él. Utilice un palillo (o una cerilla) para mezclar el suero y el antígeno comenzando desde el volumen más pequeño de suero, utilizando un palillo para cada suero.

4. Una vez completada la mezcla, coloque la placa de vidrio en la caja de reacción de aglutinación y caliéntela uniformemente o utilice otros métodos para calentarla adecuadamente hasta que la temperatura alcance aproximadamente 30 °C. Registre los resultados dentro de 3 a 5 minutos. Juicio de resultado ++++: Aparece una gran aglutinación, el líquido es completamente claro y transparente, es decir, 100% de aglutinación. +++: Hay parches de aglutinación evidentes y el líquido es casi completamente transparente, es decir, 75% de aglutinación. ++: Hay escamas de aglutinación visibles y el líquido es poco transparente, es decir 50% de aglutinación. +: El líquido es turbio y contiene pequeñas partículas, es decir, 25% de aglomeración. -: El líquido es uniformemente turbio, es decir, no se aglomera. Se utilizó como valor de aglutinación del suero el factor de dilución más alto del suero que mostró aglutinación ++. Se considera que los animales grandes (bovinos, caballos, camellos, etc.) son seropositivos para la brucelosis si el valor de aglutinación es de 0,02 ml y son sospechosos si el valor de aglutinación es de 0,04 ml. Para animales pequeños y medianos (cerdos, cabras, ovejas, etc.), si aparece un valor de aglutinación de 0,04 ml, se considera que el suero es positivo para brucelosis, y si aparece un valor de aglutinación de 0,08 ml, se considera ser sospechoso. Notas 1. Cada prueba debe controlarse con suero estándar positivo y suero estándar negativo. 2. Se debe agitar bien antes de añadir el antígeno. 3. Es mejor asegurarse de que la temperatura de reacción sea de alrededor de 30 °C y la reacción debe evaluarse en un plazo de 3 a 5 minutos. Si la temperatura de reacción es baja, el tiempo de interpretación se puede ampliar apropiadamente. 4. Si se utilizan dos volúmenes de suero para la prueba, si se produce aglutinación en cualquier volumen de suero, es necesario volver a analizar cuatro volúmenes de suero. 5. La reacción de aglutinación en placa se utiliza mejor para la detección preliminar. Si se produce una reacción positiva o sospechosa, la reacción de aglutinación en tubo de ensayo se utiliza para volver a realizar la prueba y confirmar la calificación. 6. La relación entre la aglutinación en placa y la aglutinación en tubo de ensayo. Tabla: Relación entre la reacción de aglutinación en placa y la reacción de aglutinación en tubo de ensayo Reacción de aglutinación en placa 0.080.040.020.01 Reacción de aglutinación en tubo de ensayo 1:251:501:100 1:200