¿Cuáles son las funciones del metanol y el SDS en la solución de transferencia de electroforesis por transferencia?

El SDS es un agente activo aniónico. La adición de SDS a la electroforesis en gel de polipropileno puede desnaturalizar las proteínas y estirar las cadenas peptídicas que se unen a las proteínas, haciéndolas todas cargadas negativamente. Se pueden unir aproximadamente 1,4 g de SDS por gramo de proteína. Estas cargas son mucho mayores que las cargas originales de las moléculas de proteínas, cubriendo así las diferencias de carga entre diferentes proteínas. Cuanto mayor es el peso molecular, más cargas porta. Y debido a que se somete a electroforesis en un gel de polipropileno, debido al efecto de tamiz molecular, cuanto más larga es la cadena peptídica, más lenta es la tasa de migración. Dentro de un cierto rango de peso molecular (15 KD ~ 200 KD), existe una relación lineal entre el logaritmo del peso molecular de la proteína y la movilidad de la cadena polipeptídica de la proteína. Por tanto, el peso molecular correspondiente se puede calcular basándose en la movilidad.

Se dice en Internet que el metanol puede activar el PVDF para que transporte cationes de modo que pueda combinarse con conjugados de proteínas SDS aniónicos, pero no hay ningún lugar en la fórmula química del PVDF que pueda transportar cationes. Y no entiendo por qué hidratar el metanol puede hacer que transporte cationes. . Después mi profesor me dijo que lo que se decía online estaba mal. . Los usos del metanol para activar la membrana de PVDF y el tampón de transferencia son diferentes. El PVDF no puede unirse a las proteínas debido a su hidrofobicidad y el metanol puede volverlo hidrofílico. En el tampón de transferencia, se usa metanol para eliminar el SDS. Porque en un campo eléctrico, especialmente las proteínas de molécula pequeña que se unen al SDS pueden atravesar fácilmente la membrana pero no pueden unirse a la membrana. Por lo tanto, se necesita metanol para eliminar el SDS. Mejor unión de proteínas y membranas.