¿Qué significa ApoE ratón doble knockout (DKO)?
Introducción a los ratones con doble knockout para ApoE
Por ejemplo, un vínculo clave en la investigación y el desarrollo médicos son los experimentos con animales. Para estudiar medicamentos para tratar el cáncer, se necesitan modelos de cáncer en ratones; para estudiar la diabetes, se necesitan modelos de diabetes en ratones. Después de eliminar uno o varios genes de los aproximadamente 30.000 genes en ratones, los ratones cultivados pueden convertirse en modelos animales adecuados para experimentos clínicos con fármacos y pueden imitar a pacientes humanos para investigación y tratamiento. Estos animales son un eslabón muy importante en la cadena de la industria biomédica.
Introducción a la eliminación de genes
La eliminación de genes es una nueva tecnología de biología molecular desarrollada desde finales de la década de 1980 que inactiva genes específicos del cuerpo a través de una determinada forma o tecnología faltante. La eliminación de genes en el sentido habitual utiliza principalmente el principio de recombinación homóloga del ADN para reemplazar el fragmento del gen objetivo con un fragmento homólogo diseñado, logrando así el propósito de la eliminación de genes. Con el desarrollo de la tecnología de eliminación de genes, además de la recombinación homóloga, se están aplicando gradualmente nuevos principios y tecnologías. Los más exitosos incluyen la mutación por inserción de genes y el ARNi, que también pueden lograr el propósito de la eliminación de genes.
Principios y métodos
1. Eliminación de genes mediante recombinación homóloga
La eliminación de genes se desarrolló en la segunda mitad de la década de 1980 aplicando el principio de recombinación homóloga del ADN. . Levantarse. A principios de la década de 1980, el éxito del aislamiento y cultivo in vitro de células madre embrionarias (células ES) sentó las bases técnicas para la desactivación genética. En 1985, se confirmó por primera vez la existencia de recombinación homóloga en células de mamíferos, sentando las bases teóricas para la eliminación de genes. En 1987, Thompson estableció el primer modelo completo de ratón con genes de células ES knockout. Hasta ahora, la eliminación de genes mediante recombinación homóloga sigue siendo el método más utilizado en la construcción de modelos animales con eliminación de genes.
2. La eliminación del gen inducible también se basa en el sistema Cre/loxp, pero utiliza la actividad del promotor que controla la expresión de Cre o la naturaleza inducible de la actividad de la enzima Cre expresada. El inductor proporciona control del tiempo. o utiliza la especificidad de la célula huésped del vector en el sistema de expresión de posicionamiento del gen Cre y la controlabilidad temporal del proceso de transferencia del sistema de expresión al cuerpo animal, de modo que en una cierta etapa de desarrollo y cierto tejido del animal 1oxP tecnología de eliminación del gen para lograr la modificación genética de genes específicos en las células. Las personas pueden controlar artificialmente la especificidad espaciotemporal de las mutaciones genéticas animales prediseñando el momento de la administración de inductores para evitar la muerte fetal o la muerte del animal poco después del nacimiento. Varios tipos inducibles comunes son los siguientes: tipo inducible por tetraciclina; tipo inducible por interferón; tipo inducible por hormonas;